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试剂盒提取的原则

 更新时间:2018-07-30 点击量:1321
   试剂盒提取的原则
  试剂盒的用途:用固相化的、已标记的饵蛋白或标签蛋白(生物素-、PolyHis-或GST-),从细胞裂解液中钓出与之有相互作用的蛋白质。酵母双杂交后,验证已知的“诱饵”蛋白与钓出蛋白或已纯化的相关蛋白间的相互作用关系。从体外转录或翻译体系中检测出蛋白质相互作用。
  试剂盒特点:提供了可用于发现蛋白质相互作用的一套完整、易用、经济的方案。用普通的试验仪器和试剂(如离心机、Mini-Gel、蛋白质染色)即可完成整个实验。适用于单个或多个样品。灵活的“诱饵-捕获”方式,盐离子、变性剂浓度可调,对于弱的蛋白质相互作用也适用。一天之内“捕获”和检测可能与“诱饵”蛋白相结合的蛋白。回收相互作用的蛋白质复合物。
  试剂盒配有进行分析或测定所必需的全部试剂的成套用品,操作方便,而且排除的人为配置药品的误差,因为全部试剂都是成套出现,使操作更加标准,不会有浪费的现象。
  试剂盒提取的原则
  1、保证核酸一级结构的完整性(因为遗传信息全部储存在核酸一级结构中,故完整的一级结构是保证核酸结构与功能研究的基层)。
  2、排除其它分子(如蛋白质、多糖,、脂类、有机溶剂等)的污染,使下游试验顺利进行。
  试剂盒提取的原理和方法
  DNA与组蛋白构成核小体,核小体缠绕成中空的螺旋管状结构,即染色丝,染色丝再与许多非组蛋白形成染色体。染色体存在于细胞核中,
  外有核膜及胞膜。从组织中提取DNA必须先将组织分散成单个细胞,然后破碎胞膜及核膜,使染色体释放出来,同时去除与DNA结合的组蛋白及非组蛋白。