细胞冻存有何注意事项？

细胞低温冻存是培养室常用技术。原理是将细胞放在-196℃液氮中，可以使细胞暂时脱离生长状态，减少细胞代谢，理论上储存时间几乎是无限的。那么细胞冻存有何注意事项呢？让我们一起来看看吧！

一、DMS0稀释时会释放大量热量，不能直接加到细胞液中，须事先配制，且DMSO必须是细胞培养级别的；

二、缓慢冷冻，细胞逐步脱水，不会因产生大的冰晶而受到损害；

三、选择细胞生长良好、密度约为80-90%、活力达90%以上的细胞冻存；

四、冻存时细胞密度少于5X105个活细胞/mL时，很难成功复苏；

五、细胞不可长期保存在-80°C冰箱中。我们建议在-80°C冰箱中的保存时间不要超过48h，放入液氮中保存；

六、冻存细胞操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤；

七、冻存管的盖子一定要拧紧，否则复苏水浴时会渗水，造成支原体污染；

八、定期检查液氮储备，保证细胞全部浸在液面下；

九、冻存细胞时在每支冻存管都标上细胞的名称，冻存时间，并记录在册，避免取错细胞，找不到冻存管等情况；

十、细胞在冷冻过程中在-20C冰箱内放置时间不可超过1小时，以防止冰晶过大而破坏细胞。

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