你知道在细胞培养实验中该如何避免污染吗?让我们一起来看看吧!
一、培养环境:
1)无菌室:保持清洁,经常擦洗,使污染物不易积聚。
2)超净台:
①定期维护和保养,按厂家规定定期清洗和更换空气滤器,经常保持清洁并用75%乙醇消毒;
②操作前提前30 min启动超净台紫外灯消毒;
③存放的物品应全面消毒,并尽可能只将立即使用的物品放入;
④细胞培养操作时应尽量保持层流,避免气雾状污染物进入培养器皿;
⑤操作中溅出的液体应及时擦去,并用75%乙醇擦拭消毒;
⑥实验完毕后,移走所有物品,并用75%乙醇擦洗工作台。
二、物品的消毒灭菌
①操作前应做好所用器皿、试剂的消毒灭菌工作;
②高压蒸汽灭菌是常用的方法,不能采用此法灭菌的器皿、试剂,应采用其他消毒灭菌方法,如培养基等试剂可过滤除菌,盖玻片等器械可用75%乙醇浸泡消毒后置于无菌环境中晾干;
③若物品消毒灭菌后长时间未使用,应重新处理。
三、无菌操作
防止污染的关键在于严格无菌操作。无菌意识不强、动作不准确、操作不熟练等都会造成污染。注意事项主要如下:
①细胞培养的操作一定要在超净台等层流装置内进行,无菌的试剂、器械一定要在无菌区开封;
②操作时减少交谈、咳嗽等防止来自唾沫和呼出气流造成的污染;
③培养试剂不宜过早开瓶,操作时应尽可能保持瓶体倾斜,所有瓶口不能与超净台的风向相逆,使用后应立即封闭瓶口;
④培养的细胞处理前也不要过早暴露于空气中;
⑤不要在打开器皿上方操作;
⑥不允许用手触及器皿的无菌部分(如瓶口、瓶盖内侧)。
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