免费咨询热线:
15522676233
技术文章
首页 > 技术中心 > 细胞消化的方法有什么

细胞消化的方法有什么

 更新时间:2024-01-26 点击量:98
  细胞消化的方法有什么
  在贴壁细胞传代前必需将细胞与贴附介质分离,常见的方式就是通过胰蛋白酶对细胞进行消化。那么你知道细胞消化的方法有哪些吗?让我们一起来看看吧!
  一、机械消化法
  直接用液体吹打或用刮刀,施予外力让细胞与培养底物分离;适用于贴壁性弱的细胞传代,但相较于其它消化方法,这种外力无法量化控制,细胞分散效果差,且可能会造成大量细胞破损,使内容物释放到培养基,进而影响细胞传代状态。
  二、离子螯合法
  细胞膜表面蛋白大多需要钙、镁离子来维持与胞外基质的稳定键结,当然也包含各种黏附蛋白(例:整合素、钙黏着蛋白、桥粒等),螯合剂会在不破坏细胞膜表面蛋白的状况下,抽离这些离子,使黏附蛋白失活而减少细胞-细胞间及细胞-底物间的连接作用,让细胞较容易在施予外力时,脱离培养底物并促进细胞分散。
  0.02%EDTA是细胞传代常用的离子螯合剂,在37℃作用效果佳(消化较敏感的细胞可在4℃作用),适用于消化一般贴壁性细胞或细胞表面标记实验细胞。但EDTA无法用血清终止其反应,所以在消化细胞后必须用缓冲盐溶液(如:PBS)清洗离心,以免影响后续细胞贴盘效果。
  三、酶消化法
  用蛋白水解酶消化连接细胞及培养底物的蛋白质,适用于消化贴壁性稍强的细胞。
  更多有关细胞消化的方法,请联系北京百奥创新科技有限公司。