细胞培养中的消化传代操作是指将细胞从当前的培养瓶、皿中分离出来，经过消化处理后，分散到新的培养瓶、皿中进行继续培养。那么你知道细胞消化的注意事项有什么吗？让我们一起来看看吧！
一、胰蛋白酶的选择
EDTA是一种螯合剂，可以与金属离子结合。含有EDTA的胰蛋白酶除了具有胰蛋白酶的消化作用外，还具有螯合金属离子的作用。在细胞培养中，含有EDTA的胰蛋白酶，通过螯合细胞表面的钙离子，破坏细胞与细胞之间的黏附作用，从而使细胞分离出来。
因此，如果需要进行细胞解离和分离操作，可以选择含有EDTA的胰蛋白酶；如果只需要进行消化传代操作，可以选择不含EDTA的胰蛋白酶。
二、消化时间的掌握
消化时间的长短会影响细胞的生长和状态。如果消化时间过长，可能会导致细胞死亡或者受损；如果消化时间过短，则可能会导致细胞未能完q分散，影响细胞的生长和分化。但细胞多长时间能被消化下来，并不完q取决于胰蛋白酶，还和消化的温度、细胞的密度、以及消化环境有关。
通常，37°C下进行消化可以缩短消化时间。我们的胰蛋白酶平时一般放在冰箱内，在消化操作之前，可以提前拿出。加入胰蛋白酶后，可以把培养瓶放入培养箱内进行消化，这样可以有效缩短消化时间。另外，不应该在细胞密度太高时才想起来进行消化传代。当密度太高时，细胞之间的黏连会加剧，此时同等的消化条件，会需要花费更多的时间进行消化，进一步提高了判断消化进度的难度。比较合理的传代密度应该在70-80%之间。
三、其他注意事项
在加入胰蛋白酶之前，通常会使用pbs进行润洗，润洗后，应该彻d扔弃瓶内的pbs后，再加入胰蛋白酶进行消化。
加入胰蛋白酶的量应该是刚刚没过整个培养瓶底部即可。
在消化过程中，如果发现细胞解离太快，可以把培养瓶竖起来，让瓶壁上残留的消化液进行消化。
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