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培养基中各类添加成分所具有的作用是什么?

 更新时间:2024-02-21 点击量:354

细胞培养基是供给细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质的混合物,基础细胞培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。人工合成培养基使用时还需添加一定量的血清使细胞生长和繁殖。培养基中各类添加成分所具有的作用是什么?一起学习下吧!

L-谷氨酰胺 (L-Glutamine)
是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分,是细胞生长的必须氨基酸,为培养的细胞提供重要的能量来源。脱掉氨基后,L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。但其在水溶液中不稳定,易降解产生对细胞有害的氨;而氨对于一些细胞具有毒性。

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine)

在水溶液中十分稳定,不会自发降解,其被细胞利用的机制为:细胞在培养时会向培养液中释放一种肽酶,将L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐渐水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,这种将低浓度水平的L-谷氨酰胺逐渐释放到培养液中的过程类似于流加培养策略,可以提高L-谷氨酰胺的利用率,且不会产生多余的氨,更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺适用于所有的细胞,几乎无需适应,并且可以延长细胞的培养时间,减少传代次数,细胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L- 谷氨酰胺的添加可能导致延滞期略微延长,其原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间,但不会影响后续培养。

丙酮酸钠(Sodium pyruvate)

可以作为细胞培养中的替代碳源,在葡萄糖不足的时候,细胞可以代谢丙酮酸钠,保证细胞更好地生长。

HEPES

是一种常用非离子两性缓冲液,能有效控制pH在6.8~8.2范围,尤其在pH7.2~7.4具有较好的缓冲能力。在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定pH值。因此是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,培养基添加HEPES后能够较长时间保持恒定的pH范围,可以有效的防止培养液pH波动较大对细胞生长状态产生的不利影响。与其他缓冲液如PBS相比,HEPES在维持细胞培养基的pH值方面具有更高的稳定性。

酚红

酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低pH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的pH值时使培养液呈紫色,pH值7.2~7.4时为红色,适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类激素 (特别是雌激素)的作用,因此在用到雌激素敏感的细胞时 (如乳腺组织),最好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。

以上就是有关培养基中各类添加成分所具有的作用是什么的问题解答,如果你有更多补充请咨询百奥创新客服!