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碧云天BCA蛋白浓度测定试剂盒(P0012)产品介绍

 更新时间:2024-02-29 点击量:623

BCA蛋白浓度测定试剂盒是基于广泛采用的BCA法开发的,为简便、稳定、敏感且兼容性强的蛋白浓度检测提供解决方案。该试剂盒具有高灵敏度,可检测浓度至25μg/ml,最小检测量为0.5μg,样品需1−20μl。

BCA法测定不受绝大部分化学物质干扰,可兼容高达5%的SDS、Triton X-100、Tween 20、60、80。然而,试剂盒对螯合剂和高浓度还原剂敏感,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,DTT低于1mM,β−Mercaptoethanol低于0.01%。这些特性确保了准确测定蛋白浓度,并提供可靠的实验结果。

操作使用:

1.蛋白标准品的准备

a.取1.2ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(30mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20℃长期保存。

b.取适量25mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准,加入980µl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20℃长期保存。

2.BCA工作液配制

根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。例如5mlBCA试剂A加100μl BCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。

3.蛋白浓度测定

a.将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20μl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20μl,相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。

b.加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20μl,需加标准品稀释液补足到20μl。请注意记录样品体积。

c.各孔加入200μl BCA工作液,37℃放置20-30分钟。

注: 也可以室温放置2小时,或60℃放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。

d.用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的其他波长的吸光度。

e.根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。

产品选购:

货号

产品名称

规格

P0012

BCA蛋白浓度测定试剂盒

500