碧云天总SOD活性检测试剂盒(S0101S)产品介绍

碧云天总SOD活性检测试剂盒(S0101S)是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。

目前测SOD 活性测定法有多种，最初的核黄素法、到 NBT(氮蓝四唑)法，NBT产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到 100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；本试剂盒采用的是目前稳定性更好、灵敏度更高的改性WST法即 WST-8法，改性的 WST 可以和黄嘌呤氧化酶(Xanthine Oxidase, XO)催化产生的超氧化物阴离子(O 2 .- )反应产生水溶性的甲臜染料，后者在 450nm 处有最大吸收。

使用说明：

1.样品的准备：

细胞样品的准备：对于贴壁细胞，吸净细胞培养液，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍，按照每100万细胞加入100-200微升的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液，适当吹打以充分裂解细胞；对于悬浮细胞，600g离心5分钟收集细胞，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍，按照每100万细胞加入100-200微升的比例加入SOD样品制备液，适当吹打，以充分裂解细胞。4℃约12,000g离心3-5分钟，取上清作为待测样品。

2.试剂盒的准备工作：

WST-8/酶工作液的配制：按照每个反应160μl的体积配制适量的WST-8/酶工作液。均匀混合151μl SOD检测缓冲液、8μl WST-8和1μl酶溶液，即可配制成160μl WST-8/酶工作液。根据待检测样品(包括标准品)的数量，配制适量的WST-8/酶工作液。配制好的WST-8/酶工作液4℃或冰浴保存，可以在当天使用，但建议尽量现配现用。

3.样品测定：

使用96孔板设置样品孔和各种空白对照孔。依次加入待测样品和其它各种溶液。加入反应启动工作液后充分混匀。注意：加入反应启动工作液后反应即会开始，可以在低温操作或用排枪操作以减小各孔间因加入反应启动工作液的时间先后差异而导致的误差。

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