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免疫荧光实验的常见问题与注意事项

 更新时间:2024-03-12 点击量:207
  免疫荧光技术是一种建立在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础之上的先进技术。它基于抗原抗体反应的原理,首先将已知的抗原或抗体标记上荧光标签,然后使用这些荧光标记的抗体(或抗原)作为探针,用来探查细胞或组织中的相应抗原(或抗体)。那么你知道免疫荧光实验的常见问题与注意事项吗?让我们一起来看看吧!
  一、注意事项:
  为进行免疫荧光实验,我们需要准备细胞样本,而这些细胞样本有多种来源和处理方式。
  一种是可以使用直接附着在盖玻片上的贴壁细胞。这类细胞在培养时,只需将盖玻片放入培养皿中,细胞便会在上面黏附并生长。这种方法特别适用于附着性较好的细胞类型,因为可以减少后续漂洗步骤时细胞脱落的风险。
  另一种选择是使用离心分离后的悬浮细胞,这些细胞需要制备成涂片。此外,还可以从体内组织中获得细胞悬液,然后通过离心制备成涂片,这适用于特定实验需求。
  在选择细胞准备方式时,需根据具体实验的要求和所使用的细胞类型来决定,以确保最终获得可靠的免疫荧光实验结果。
  二、常见问题:
  1、无/弱染色烤片温度过高,推荐56℃-60℃1-2h;一抗是否适用固定液和石蜡切片,使用浓度是否过低,孵育是否时间过短等。
  2、非特异性背景染色是否灭活内源性过氧化物酶;孵育过程中干片;抗原热修复过度。
  3、染色过深一抗浓度过高;染色试浓度过高或孵育时间过长;染色剂浓度过高或孵育时间过长。
  更多有关免疫荧光实验的常见问题与注意事项,请联系北京百奥创新科技有限公司。