Elabscience一步法TUNEL流式凋亡检测试剂盒(E-CK-A423)现货供应

产品简介：

Elabscience® One-step TUNEL Flow Cytometry Apoptosis Kit 是一款灵敏度高且能快速简便地检测细胞凋亡的产品。本试剂盒可通过流式细胞仪来进行悬浮细胞、贴壁细胞的流式凋亡检测。

检测原理：

细胞在发生凋亡时，会激活一些特异性的 DNA 内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组 DNA。使得凋亡细胞的DNA被切割成180~200bp片段，在琼脂糖凝胶上通常以180~200bp的阶梯状迁移。细胞经过固定破膜后，TdT 酶 （脱氧核糖核酸末端转移酶）将荧光标记的 dUTP 连接到细胞断裂DNA暴露的3'-OH 末端，通过流式细胞仪检测dUTP偶联物发出的荧光信号，从而来检测晚期凋亡。

保存条件：

-20°C 保存，保质期一年。Labeling Solution 需避光保存，Labeling Solution、Fixation Buffer、Permeabilization Buffer 需避免反复多次冻融，建议分装保存。

常见问题及解决方法：

1. 细胞碎片较多

可能原因：

固定不充分，破膜导致细胞破碎。破膜时间过久，破膜温度较高。

解决方法：

适当延长固定的时间，充分固定细胞后再破膜。破膜时间应控制在 10 min，最长不超过 15 min，保证在冰上破膜。

2. 未检测到凋亡细胞群

可能原因：

细胞诱导凋亡失败。细胞数目较多，细胞透膜不che底。用含有EDTA 等蝥合剂的试剂洗涤细胞，导致 TdT 酶失效。

解决方法：

设置不同的浓度梯度和诱导时间，找到合适的诱导条件。

适当调整细胞数量，或增加Permeabilization Bufer 的剂量，合理充分破膜。

使用不含螯合剂的洗涤液。

产品选购：