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Elabscience谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)比色法测试盒(E-BC-K096-M)产品介绍

 更新时间:2024-03-18 点击量:264

Elabscience谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)比色法测试盒适用于检测血清、血浆、培养细胞、培养液及动植物组织样本中的GSH-Px 活力。

GSH-Px的作用是促进过氧化氢(H2O2)与还原型谷胱甘肽(GSH)反应生成水(H2O)和氧化型谷胱甘肽(GSSG),反应式如下图所示。为了表示酶的活力,可以测定单位时间内底物GSH被氧化的速度。剩余的GSH与二硫代双硝基苯甲酸(DTNB)发生反应,生成黄色的硫代硝基苯甲酸阴离子(TNB),通过测定该阴离子的浓度来计算GSH的减少量。由于在没有酶的条件下,GSH也会发生氧化(非酶反应),因此在计算酶活力时,需要扣除非酶反应引起的GSH减少量。

微信截图_20240318142829.png


实验关键点

非酶管及酶管加入试剂二离心后的上清液必须澄清。

样本处理后必须做预实验。

试剂一应用液必须在 37℃预温 5 min

当抑制率小于 10%时,可增加样本量。

操作步骤

酶促反应:

非酶管:取20μL 1 mmol/L GSH 标准品,加入1.5 mL EP管中;

酶管:取20μL 1mmol/L GSH 标准品,20μL待测样本,加入1.5 mL EP管中混匀。

将酶管、非酶管及试剂一应用液 37℃预温5 min

向酶管和非酶管加入10μL试剂一应用液,混匀,37℃准确反应 5 min

向非酶管加入200μL试剂二和20μL 待测样本,混匀;向酶管加入200μL试剂二,混匀。

3100×g离心0 min,取100μL上清液作显色反应。(若上清液中含有部分沉淀物,将上清液转入新的EP管中,再次离心)

显色反应:

标准孔:取100μL不同浓度标准品,加入到对应的标准孔中:

非酶孔:取100μL非酶管中的上清,加入到非酶孔中;

酶孔:取100μL酶管中的上清,加入到酶孔中。

向步骤①中各孔分别加入100μL试剂三。

向步骤②中各管分别加入50μL试剂四。

酶标仪上震板10 s,静置5 min,酶标仪412 nm,测其吸光度值。

注:当样本抑制率小于10%时,可增加样本量进行检测。

产品选购:

货号

产品名称

规格

E-BC-K096-M

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)比色法测试盒

48T(16 samples)

96T(40 samples)


产品名