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细胞转染的方法

 更新时间:2024-03-23 点击量:128
  转染(Transfection),是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。
  转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。那么你知道细胞转染的方法有什么吗?让我们一起来看看吧!
  转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。
  一、化学转染法:
  1.磷酸钙法
  原理:磷酸钙DNA复合物吸附细胞膜被细胞内吞
  应用:稳转,瞬转
  特点:不适用于原代细胞,操作简便但重复性差,有些细胞不适用
  2.阳离子脂质法
  原理:带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞
  应用:稳转,瞬转,所有细胞
  特点:适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清,转染效果随细胞类型变化大
  3.DEAE-右旋糖苷法
  原理:带正电的DEAE-右旋糖苷与核酸带负电的磷酸骨架相互作用形成的复合物被细胞内吞
  应用:瞬转
  特点:相对简便、结果可重复,但对细胞有一定的毒副作用,转染时需除血清
  二、生物转染法
  1.病毒介导法
  原理:通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中
  应用:稳转
  特点:可用于难转染的细胞、原代细胞,体内细胞等
  2.逆转录病毒
  应用:持定宿主
  特点:但携带基因不能太大细胞需处分裂,需考虑安全因素
  3.腺病毒
  原理:通过侵染宿主细胞将外源基因整合到染色体中
  应用:瞬时转染,待定宿主
  特点:可用于难转染的细胞,需考虑安全因素
  三、物理转染法
  1.Biolistic颗粒传递法
  原理:将DNA用显微重金属颗粒沉淀,再将包被好的颗粒用弹道装置投射入细胞,DNA在细胞内逐步释放表达
  应用:瞬转
  特点:可用于:人的表皮细胞,纤维原细胞,淋巴细胞系以及原代细胞
  2.电穿孔法
  原理:高脉冲电压破坏细胞膜电位,DNA通过膜上形成的小孔导入
  应用:稳转,瞬转,所有细胞
  特点:适用性广但细胞致死率高,DNA和细胞用量大
  3.显微注射法
  原理:用显微操作将DNA直接注入靶细胞核
  应用:稳转,瞬转
  特点:染细胞数有限,多用于工程改造或转基因动物的胚胎细胞
  更多有关细胞转染的方法,请联系北京百奥创新科技有限公司。