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Beyotime碧云天lipo8000转染试剂(c0533)现货供应

 更新时间:2024-04-18 点击量:222

产品名称:Beyotime碧云天lipo8000转染试剂(c0533)现货供应

产品货号:c0533

产品品牌:碧云天

产品简介:

碧云天lipo8000转染试剂(c0533)是碧云天最新研发的一种以纳米材料为基础的zui便捷的高效细胞转染试剂,达到甚至超过了国际主流转染试剂的转染效果,并且转染过程无须任何孵育时间,实现了细胞转染的至简操作。适用于把质粒、siRNA或其它形式的核酸包括DNA、RNA、寡核苷酸、以及核酸蛋白复合物或带负电荷的蛋白转染到真核细胞中,也可以用于活体动物的核酸转染以及用于基因治疗。

常见问题:

1. 转染效率低:

a. 优化质粒与Lipo8000™转染试剂比例,对于难转染的细胞,可适当增加Lipo8000™转染试剂的用量。

b. 应使用高纯度、无菌、无污染物的质粒进行转染,DNA纯度方面A260/A280比值要接近1.8,通常宜控制在1.8-1.9范围内,偏低则有可能有蛋白污染,偏高则有可能有RNA污染。可以使用碧云天生产的质粒大量抽提试剂盒(D0026)进行抽提,以保证可以获得较高的转染效率。

c. 贴壁细胞转染时状态良好,细胞密度达70-80%时才可进行转染,过稀或过密都可能影响转染效率,不同细胞的最佳转染密度需要自行摸索。悬浮细胞宜在对数生长期进行转染。

d. 需使用无抗生素和无血清培养液配制Lipo8000™转染试剂和质粒或siRNA等的混合物。

e. 转染后培养时间不足,而被误以为转染效率偏低。不同细胞转染后至显著表达所需要培养的时间通常为24-48小时。

f. 检查细胞是否有支原体感染,支原体感染会影响细胞增殖,并很可能影响转染效率。

g. 使用传代次数相对较少的细胞,细胞传代次数太多,对转染效率会有一定的影响。

h. 如果没有检测到目的蛋白表达,应该仔细核对转染质粒的测序结果,确保测序结果和读码框wan全正确。启动子、复制起始位点、质粒大小都会影响基因表达水平。

i. 如果靶基因的敲减(knockdown)效果欠佳,应该考虑尝试设计不同的siRNA。

2. 出现一定程度的细胞毒性:

a. 转染前,细胞至少铺板 18-24 小时。

b. 质粒用量不变,Lipo8000™转染试剂的用量减少 25%。例如通常六孔板每孔使用 2.5μg 质粒,4μl Lipo8000™,如果发现有细胞毒性,六孔板每孔可以尝试使用 2.5μg 质粒,3μl Lipo8000™,此时经测试对于转染效率没有很明显的影响。

c. 减少质粒用量,按照比例减少 Lipo8000™转染试剂;或在前者的基础上 Lipo8000™转染试剂用量再减少 25%。

d. 检查是否转染时细胞密度太低,Lipo8000™转染时细胞密度以 70-80%为佳。

e. 某些细胞对 Lipo8000™转染试剂比较敏感,可以在转染后 4-6 小时更换细胞培养液,转染效率无显著影响。

f. 检查细胞是否有支原体等微生物污染。

产品选购:

货号

产品名称

规格

c0533-0.5ml

lipo8000转染试剂

0.5ml

c0533-1.5ml

1.5ml

c0533-7.5ml7.5ml

北京百奥创新科技有限公司现货供应Beyotime碧云天lipo8000转染试剂(c0533),欢迎选购!