Elabscience小鼠胰岛素ELISA试剂盒(E-EL-M1382)现货供应

产品名称：Elabscience小鼠胰岛素ELISA试剂盒(E-EL-M1382)现货供应

产品货号：E-EL-M1382

品牌：Elabscience

产品规格：96T;48T;96T*5

储存条件：试剂盒在 2-8℃可保存 3 个月。

实验步骤：

1.分别设定标准孔、空白孔和样本孔。标准孔加入 100 μL倍比稀释的标准品， 空白孔加入 100 μL 标准品&样本稀释液，其余孔加入 100 μL 待测样本(建 议所有的待检样本和标准品在检测中设立复孔；建议通过预实验或咨询技 术支持确定待检样本的稀释倍数)。给酶标板覆膜，37℃孵育 90 分钟。提 示：加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，避免 产生气泡。加样时间宜控制在 10 分钟内。

2.甩尽孔内液体，不用洗涤。每个孔中加入生物素化抗体工作液 100 μL，酶 标板加上覆膜，37℃温育 1 小时。

3.甩尽孔内液体，在洁净的吸水纸上拍干。每孔加洗涤液 350 μL，浸泡 1 分 钟，吸去或甩掉酶标板内的液体，拍干。重复此洗板步骤 3 次。提示：此 处与其他洗板步骤都可使用洗板机(参考北京拓普 DEM-3 型洗板机参数设 置：2 点吸，每孔加入洗涤液 350 μL，振板 5 秒，吸液 0.5 秒)。洗板完成 后请立即进行下步操作，不要让微孔板干燥。

4.每孔加 HRP 酶结合物工作液 100 μL，酶标板加上覆膜，37℃温育 30 分钟。

5.甩尽孔内液体，洗板 5 次，方法同步骤 3。

6.每孔加底物溶液(TMB)90 μL，酶标板加上覆膜，37℃避光孵育 15 分钟左 右。提示：根据实际显色情况酌情缩短或延长，但不可超过 30 分钟。当标 准孔出现明显梯度时(前 4 个显色孔出现明显蓝色梯度)，即可终止。提前 15 分钟打开酶标仪预热。

7.每孔加终止液 50 μL，终止反应。提示：终止液的加入顺序应尽量与底物溶 液的加入顺序相同。

8.立即用酶标仪在 450 nm 波长测量各孔的光密度(OD 值)。

实验结果：

1. 计算标准品和样本复孔的平均OD值并减去空白孔的OD值作为校正值。以 浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在双对数坐标轴上拟合四参数逻辑函数的 标准曲线。
2.若样品OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测并在计算样本浓度时乘 以相应的稀释倍数。

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