什么是荧光原位杂交技术

　　什么是荧光原位杂交技术

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　　一、FISH的定义

　　荧光原位杂交技术（FISH）是一种利用荧光信号检测探针的原位杂交技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性及直观性和原位杂交的高特异性结合起来，通过荧光标记的核酸探针与待测样本核酸进行原位杂交。在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞和组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。

　　二、FISH的原理

　　FISH分为直接法和间接法。

　　直接法是在已知碱基序列的核酸探针上标记荧光素，在组织切片、间期细胞及染色体标本上与靶核酸进行原位杂交。因所形成的杂交体带有荧光素。故可在荧光显微镜下直接观察。

　　间接法使用非荧光物质标记的核酸探针。如生物素或地高x等标记探针，再通过亲和连接或免疫反应带入荧光物质来检测杂交体的存在。

　　广义上讲，FISH靶序列可以是DNA或RNA，既可以用来进行基因组层面的研究，也可以进行表达层面的研究。

　　目前常用的荧光素有异硫氰酸荧光素、得克萨斯红、罗丹明及其衍生物四甲基异硫氰酸罗丹明等。

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