凡知医学高保真PCR预混液原理

一、凡知医学高保真PCR预混液目录表

二、凡知医学高保真PCR预混液原理

凡知高保真PCR预混液的原理主要基于PCR技术、高保真DNA聚合酶的使用，以及特定的缓冲体系和添加剂，以确保高特异性和高保真性。

1. PCR技术

聚合酶链式反应（PCR）技术，这是一种在体外酶促扩增特定DNA片段的技术，类似于DNA的天然复制过程。PCR技术利用一对与模板DNA两端互补的寡核苷酸引物，在DNA聚合酶的作用下，沿着模板链延伸至完成新的DNA合成，不断地重复这一过程，使目的DNA片段以指数级进行扩增。引物与DNA片段的特异结合决定了扩增的特异性。其主要过程由变性、退火和延伸三个步骤反复循环组成，每循环一次，双链DNA分子数量即增加一倍‌。

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2. 高保真DNA聚合酶

凡知高保真PCR预混液包含Hieff Canace Plus High-Fidelity DNA Polymerase，这是一种具有高保真性的酶，其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍，是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。这种酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性，后者能够校正错误，从而提高PCR产物的保真性。预混液中还添加了延伸因子，使得该酶具有长片段扩增能力，扩增目的片段的长度可达13 kb。

3. 特定的缓冲体系和添加剂

预混液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体，这简化了实验步骤，使得高特异性的Hot Start PCR变得简便易行。凡知医学的高保真PCR预混液还可能包含电泳指示染料，使得PCR产物可以直接进行电泳检测，简化了实验步骤，提高了实验效率。此外，该产品还可能含有特异保护剂，使得预混液在反复冻融后仍能维持稳定活性，保证了实验的可靠性和重复性‌。该预混液还具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可，并通过两步法的程序进行扩增。产品中还含有电泳指示染料，使得PCR产物可直接进行电泳检测。此外，该产品还含有特异保护剂，使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。

总的来说，凡知高保真PCR预混液通过使用PCR技术、高保真DNA聚合酶以及电泳指示染料和特异保护剂的添加，实现了高效、高保真的PCR扩增反应，适用于复杂模板的扩增，扩增产物为平末端，为分子生物学研究提供了高效且可靠的工具。

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