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Elisa试剂盒怎么选?

更新时间:2024-09-19点击次数:867
在选择 ELISA 试剂盒时,不同的用户往往有不同的选择标准,无论是灵敏度、样本类型还是简便性,核心标准是 ELISA 试剂盒的重现性。

一、试剂盒的应用种属、检测样本的种类

一般来说,生产厂家都会在产品名称上标明种属,ELISA试剂盒种属:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待检样本种类:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等。

二、试剂盒的检测范围

就是标准曲线范围,特别要注意待测样本浓度是否落在标准曲线范围内,对于高浓度样本,需要先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。

三、特异性

就是阴性样本的阴性检出率,与试剂盒的关键组分抗体对有关,确保抗体对杂质无交叉反应,交叉反应越小,特异性越好。具体要求是试剂盒尽可能采用单抗,若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗。

四、灵敏度

灵敏度简单来说就是阳性样本的阳性检出率,反映的是试剂盒对于被检物质的低检测能力。如果待测样本浓度很低,则需选择高敏的ELISA试剂盒。

五、精密性

又称重复性,是对同一样品重复测定时误差大小的评估参数。科学实验讲求重复性,一般而言,ELISA试剂盒,其板内和板间变异系数,国产试剂的变异系数在20%内,进口试剂在15%内。

六、回收率

将已知的低、中、高浓度的标准品掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间。

七、稀释线性

认的实验线性:样本稀释后,最终分析物浓度应该相同。在天然样本基质中添加有适当浓度的标准品,分别稀释不同倍数,测定各浓度下的回收率,线性通常介于80-120%之间。

八、稳定性

稳定性是试剂盒必需的基本属性,是指试剂盒在有效期内和规定条件下保持其性能的能力,一般有效期稳定性、运输稳定性以及冻融稳定性。一般以加速破坏性实验进行验证,将未拆封的试剂盒在37°C2-8°C分别放置一定时间,考察各项性能指标的偏差,以偏差小于10%为合格。稳定性越好,试剂盒存储时间越长。

九、简便性

试剂盒在保证高质量数据的情况下,实验时间越短,操作越便利越好。

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