WB实验中的蛋白酶抑制剂

一、WB实验中的蛋白酶抑制剂作用

WB实验中的蛋白酶抑制剂主要是在蛋白质提取过程中，防止蛋白质水解，从而保持蛋白质的完整性。在蛋白质纯化、提取过程中常受到其本身存在的水解酶的影响。在提取蛋白质的过程中细胞破碎释放出蛋白酶，这些酶在与欲提取的蛋白质接触时，一旦条件适宜，就会发生反应，导致蛋白质分解。

二、WB实验中的蛋白酶抑制剂的作用原理

蛋白酶抑制剂（protease inhibitor）从广义上指与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合，使蛋白酶活力下降，甚至消失，但不使酶蛋白变性的物质。

三、WB实验中的蛋白酶抑制剂的使用条件

1. 因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

2. 由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，应注意在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂时应充分混匀，以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

四、常用的蛋白酶抑制剂的分类

1.苯甲基huang酰氟化物( PMSF)

2. 乙二胺四乙酸钠( EDTA-Na2 )

3.胃蛋白酶抑制剂

4.亮抑蛋白酶肽

5.胰蛋白酶抑制剂

6.抑胃肽

7.胱蛋白酶抑制剂

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