细胞污染在细胞培养过程中,非常常见。目前为止,防止细胞污染的首要手段是预防。细胞污染通常会出现在生物安全柜和培养箱这两个地方,因此,如何做好这两个地方的预防措施呢?
一、所有进入安全柜的东西都要尽可能保证无菌
直接购买商用试剂和耗材是稳定的方式,如Gibco、中科百抗的血清,Corning的耗材等,这些品牌的试剂和耗材一般只要是正品都可以保证无菌。若自己配制的试剂,那么在配制中需要严格按无菌操作进行。
二、分装的试剂建议过滤一次
试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次,减少污染的可能性。
三、安全柜每次使用前需要灭菌、换气
生物安全柜在每次使用前需要紫外照射30min灭菌,然后通风5min以上保证换气到位。
四、实验过程中注意试剂的封盖问题
实验过程中所有试剂不用时需要盖上瓶盖,瓶盖打开时除了干净的吸头,其他任何东西都不要从瓶口的上方经过。如果使用培养皿培养细胞,则处理时不要长时间打开皿盖。
五、培养皿培养细胞操作要轻柔
如果使用培养皿培养细胞,放入培养箱前摇匀时要轻柔,不要将培养基摇到皿盖和皿身的间隙中,这样在细胞生长时很容易污染。
六、及时清理污染的细胞
晚期污染则是细胞形态发生明显改变,细胞停止生长,显微镜下可见大量微生物。这时候建议大家及时清理掉相关细胞,以免污染其他细胞。在对安全柜和培养箱进行消毒后,再重新复苏早批次的细胞。
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