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凯杰(QIAGEN)的RNA提取试剂盒种类非常多,针对不同的样本来源(如血液、细胞、组织、植物等)和不同的RNA类型(总RNA、小RNA、miRNA等)有专门的系列。
其中经典和常用的是 RNeasy系列(用于总RNA提取)。下面以 RNeasy Mini Kit (50) 为例,详细介绍试剂盒中通常包含的组件。
重要提示: 不同试剂盒内容物会略有差异,请务必以您手中的试剂盒说明书为准。
核心组件(以RNeasy Mini Kit为例):
一套标准的试剂盒通常包含以下物品:
凯杰rna提取试剂盒核心组件一:裂解结合体系
Buffer RLT: 裂解缓冲液。这是最关键的试剂,含有高浓度异硫氰酸胍(guanidine thiocyanate),能迅速裂解细胞并灭活RNase,保护RNA不被降解。
注意:使用前需按比例加入β-巰基乙醇(β-ME),β-ME是单独提供的,不包含在试剂盒内,需用户自备。
Buffer RW1: 洗涤缓冲液。用于第一次洗涤吸附在膜上的RNA,去除杂质。
Buffer RPE: 洗涤和去盐缓冲液(含乙醇)。用于第二次和第三次洗涤,能彻d去除盐分和其他杂质,确保最终RNA产物的纯度。
注意:使用前需按说明书要求加入指定体积的无水乙醇。
凯杰rna提取试剂盒核心组件二:纯化组件
RNeasy Mini Spin Columns: 离心柱。核心纯化装置,柱子底部有硅胶膜,能在高盐条件下特异性地吸附RNA,而蛋白、DNA等杂质则被洗去。
Collection Tubes (2 mL): 收集管。用于装载离心柱并承接流穿液。通常有1.5 mL和2 mL两种规格,提供足量。
凯杰rna提取试剂盒核心组件三:洗脱液
RNase-free Water: 无RNase水。用于最后一步将纯化的RNA从硅胶膜上洗脱下来。这是确保RNA不被降解的关键。
凯杰rna提取试剂盒核心组件四:其他可能包含的组件(取决于您购买的套餐)
蛋白酶K (Proteinase K): 用于消化蛋白含量特别丰富的复杂样本(如动物组织)。
DNase I (RNase-Free DNase Set): 通常需要单独购买,但有时会作为套餐的一部分。用于在纯化过程中在柱上消化残留的基因组DNA,避免DNA污染。如果购买,会包含:
DNase I 干粉
Buffer RDD (用于溶解和稀释DNase I)
凯杰rna提取试剂盒核心组件五:耗材
试剂盒通常不包含但实验必需的物品:
β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)
无水乙醇(用于配制Buffer RPE)
1.5 mL无RNase的收集管(用于最后收集洗脱的RNA)
各种无RNase的枪头和离心管
总结列表:
一个典型的RNeasy Mini Kit可能包含:
希望这个列表对您有帮助!实验前请务必阅读具体的产品说明书。
选购建议:
如果您处理的样本含有大量基因组DNA(如基因组很大的动植物组织),强烈建议同时购买RNase-Free DNase Set,以便在纯化过程中进行柱上DNA消化,获得更纯净的RNA。
购买渠道:
凯杰代理——北京百奥创新科技有限公司,欢迎咨询选购。
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