赛默飞BCA蛋白定量试剂盒说明书

一、 核心优势：为什么选择赛默飞的BCA试剂盒？

与传统的Bradford法或Lowry法相比，赛默飞的BCA试剂盒具备多项满足现代实验室需求的突出优势：

1. 更广泛的兼容性：对样品中常见浓度的去垢剂（如SDS、Triton X-100） 和还原剂（如DTT、β-巯基乙醇） 具有更强的耐受性，显著减少了样品制备带来的干扰。

2. 更高的灵敏度与更宽的线性范围：检测范围通常可达20-2000 μg/mL，标准曲线线性优异（R² > 0.99），既能检测微量样品，也能准确定量高浓度样本，无需频繁稀释。

3. 出色的稳定性：显色反应完成后，吸光度在室温下可稳定数小时，特别适合高通量96孔板操作，无需紧张地即时读数。

4. 灵活的操作形式：提供微孔板法和试管法两种标准操作程序，适配不同通量和仪器需求。

二、 产品核心信息与实验方案

赛默飞提供多种规格的BCA试剂盒（如货号23225、23227等），经典套装通常包含以下组分：

标准操作流程（微孔板法）：

工作液配制：按50:1的体积比混合试剂A与试剂B，充分混匀。此工作液室温下可稳定24小时。

绘制标准曲线：用与样品相同的缓冲液，将蛋白标准品梯度稀释为一系列已知浓度（如0, 125, 250, 500, 750, 1000, 1500, 2000 μg/mL）。

加样与反应：在微孔板中分别加入标准品和待测样品（通常25 μL），再加入200 μL BCA工作液，轻轻震荡混匀。

孵育与测定：盖上板盖，于37°C孵育30分钟，或60°C孵育15分钟（高温可提高灵敏度）。随后在酶标仪上测定562 nm处的吸光度值。

计算浓度：根据标准曲线和样品吸光度值，计算未知样品的蛋白浓度。

三、 关键技巧与注意事项

为了获得可靠的数据，以下几点至关重要：

1. 标准曲线是关键：每次实验都必须制作新鲜的标准曲线，且标准品与待测样品的基质（缓冲液成分）应尽可能一致。

2. 控制孵育温度与时间：孵育时间和温度直接影响显色深度，需确保所有孔的反应条件一致。推荐使用恒温孵育器而非室温放置。

3. 样品颜色干扰：如果样品本身有颜色，需设置样品背景对照孔（用PBS代替BCA工作液），在最终计算时扣除背景值。

4. 数据有效性判断：样品的吸光度值应落在标准曲线的线性区间内。若超出范围，需对样品进行适当稀释后重新测定。

四、 典型应用场景

1. 蛋白纯化过程监控：快速测定洗脱组分中的蛋白浓度，绘制纯化图谱。

2. 细胞与组织裂解液定量：为Western Blot等实验进行上样量均一化。

3. 抗体浓度测定：用于杂交瘤上清或纯化后抗体的初步定量。

4. 药物研发与质量控制：在生物制药工艺中监测蛋白表达量与产物浓度。

赛默飞代理——北京百奥创新科技有限公司，提供赛默飞BCA蛋白定量试剂盒等产品。

北京百奥创新科技有限公司是中关村高新技术企业，于2017年在北京成立。百奥创新在产品自主研发的同时，也与全球多家生命科学试剂供应商建立良好的合作关系，基于“客户第一”的核心理念，向全国10000+客户提供200000+优质产品。公司以北京运营中心为主体，在天津、上海、浙江、江苏、广州、深圳、武汉、成都、重庆等地建立办事处及联络中心，并建有北京、天津、深圳三大专业化库存与物流基地，以更好地服务全国客户。