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CRISPR-CAS9基因编辑

 发布时间:2019/3/5 点击量:1461

CRISPR-Cas9 是近年兴起的用于靶向基因组特定位置,进行DNA修饰的重要工具。研究发现CRISPR是细菌为了应对病毒的攻击而演化而来的获得性免疫防御机制。具体来说,在CRISPR和Cas9的作用下,经由小RNA分子的引导,靶向并沉默入侵者遗传物质核酸的关键部分。在该系统中,crRNA(CRISPR-derived RNA)与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成的复合物能特异性识别靶基因序列,并引导Cas9核酸内切酶在靶定位点剪切双链DNA,随后,细胞的非同源末端连接修复机制(NHEJ)重新连接断裂处的基因组DNA,并引入插入或缺失突变。另外也可以提供一个外源双链DNA供体片段(Donor)通过同源重组(HR)整合进断裂处的基因组,从而达到对基因组DNA进行修饰的目的。
目前,CRISPR-Cas9系统的基因组编辑功能已被应用于多种生物,包括小鼠、大鼠、斑马鱼、秀丽隐杆线虫,也包含多种细菌和植物,甚在人体上也有应用。


 
基因编辑与RNA干扰的区别

方法

靶标

质粒构建

基因表达

基因敲除

基因定点突变

基因组改变

遗传密码子改变

遗传性

RNAi

mRNA

(转录水平)

简单

下调

否 

可借助病毒实现

CRISPR-CAS9

DNA序列(基因组水平)

简单

敲除

TALEN

DNA序列(基因组水平)

复杂

敲除

基因编辑技术优势
1、操作简单,靶向性高。
2、可实现对靶基因特定位点定点敲除。
3、可同时对多个靶基因进行敲除。
4、可应用于任何物种。
5、CRISPR-Cas9系统是由RNA调控的对DNA的修饰,可稳定遗传。
服务项目
普通载体、Cas9/Donor腺病毒颗粒、Cas9慢病毒颗粒
定制gRNA和HR供体载体
基因敲除细胞株
Gene Knock-Out,Knock-in或Gene标记
客户需要提供材料
1、物种、基因名称或者基因ID;
2、提供靶细胞。
服务流程
1、提交项目课题相关需求和资料。
2、与我们的专业技术团队讨论项目细节。
3、根据讨论后的意见对实验方案进行修改。 
4、双方均满意并达成一致,签订技术服务合同。
5、开展实验,按期完成合同规定的内容。
6、结题,提供实验原始结果和分析结果、实验流程、实验条件等等。
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