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RNA提取试剂盒是如何使用的呢?

 发布时间:2021-11-11 点击量:25
 
  RNA提取试剂盒用于从细胞、组织、新鲜血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA,用LB10裂解样品后,加入氯仿,溶液分为无色水相和粉红色有机相,RNA在水相中;用RNA硅胶膜离心柱特异地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA),流出液中的smallRNA用miRNA硅胶膜离心柱特异地吸附。与其它miRNA提取方法相比,该试剂盒裂解能力强、提取量高、专一性强,应用范围广。
  RNA提取试剂盒使用方法:将0.5mL结合液加入到一管装有1mgOligo(dT)纤维素的离心管中,放置5分钟后离心吸弃上清后待用。将制备的总RNA100μL加热到65℃5分钟后加入等体积的结合液,转移到装有Oligo(dT)纤维素的离心管中,颠倒混匀数次,离心后将上清转移到一个离心管中。用0.5mL结合液,混匀后4℃200g离心5分钟,小心弃上清。重复上步洗3-5次,用RNase-free水洗脱mRNA,用微量核酸沉淀剂沉淀回收mRNA。
  RNA提取试剂盒具有下列特点:
  1、直接从总RNA中提取RNA,即开即用,非常方便。
  2、处理量大,一次可以处理10μg总RNA。
  3、操作简单,只需要离心就可以完成,免去了灌柱、洗柱等麻烦。
  4、得到的RNA可以直接用于构建cDNA文库、蛋白质的体外翻译和RT-PCR。