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培养基制备的注意事项

 更新时间:2024-06-21 点击量:415
  培养基的作用是为微生物提供生长和繁殖所需的营养物质和环境条件。培养基的质量直接关系到检验结果的准确性和可靠性,因此对于微生物检验而言,培养基的质量控制尤为重要。那么你知道培养基制备的注意事项有什么吗?让我们一起来看看吧!
  一、配置要求
  正确地制备培养基是进行微生物检验的基础。当实验人员使用商业化脱水合成培养基来配制培养基时,应严格按照产品说明进行配制,并做好配制记录。在配制过程中,实验人员需要遵守相关操作标准,戴上口罩以防吸入含有有毒物质的培养基粉末。在称量和溶解培养基时应使用专门的角匙,避免使用金属制品以防止金属离子污染培养基,从而影响微生物的生长。在准确称量后,应首先加入适量的水进行充分溶解,然后再加入所需量的水进行加热。在加热过程中,应不断搅拌以防止培养基在容器底部积聚。调节培养基的pH值后,将其分装到比培养基体积大20%的容器中,并按照说明进行灭菌处理。对于粉末状态的培养基,在开封后应妥善保存在阴凉干燥处,并及时使用,以免受潮、结块或污染等情况发生。二、配制用水
  水是制备培养基不可缺一部分,通常使用纯化水。此外,还应定期检查用于配制培养基的水的微生物污染情况,以确保其符合纯化水的要求。
  三、灭菌
  灭菌能够确保培养基的质量符合标准。在实验室中,常采用湿热灭菌法对培养基进行灭菌处理。培养基的灭菌应按照产品使用说明的要求进行操作,并在每次灭菌时放置压力蒸汽灭菌化学指示卡以验证灭菌效果。有些培养基可以通过煮沸的方式进行灭菌,例如结晶紫中性红胆盐琼脂培养基和亚硫酸铋琼脂培养基。实验人员应及时将培养基从灭菌锅中取出,并尽快冷却至所需温度,以防止加热过度对实验数据产生影响。在使用培养基前,还需检查其pH值、色泽和均匀度等指标,以确保符合要求后贴上标签,并标明名称、日期、有效期等基本信息。
  四、制备
  在制备平板培养基时,应将经灭菌处理的培养基倾注于经灭菌处理的干燥平皿中,使其形成至少3mm的厚度。一般来说,直径为90mm的平皿通常需要加入18~20mL的琼脂培养基,而需要保存或培养超过48小时的培养基则需要倾注更多的培养基。制备好的培养基应立即使用或储存,储存时应标记培养基的名称和制备日期,并将其密封后放置在2~8℃的冰箱中。而在制备斜面培养基时,应先将培养基分装到试管中,通常每管加入10mL的培养基,然后进行高压灭菌。在培养基冷却凝固前,将试管倾斜一定角度放置,待其冷却凝固后方可使用和储存。至于液体培养基,则根据使用要求直接分装至三角瓶或试管中,进行灭菌处理后冷却至室温,即可直接使用或储存。
  五、储存
  验收入库的培养基应严格按照生产厂家标明的储存条件、保存期限、使用方法保存和使用。开封后的商品化脱水合成培养基要放置在密闭容器中保存,在瓶身注明s次开封日期。实验室自制培养基应避光、干燥保存,需冷藏的培养基可放置在2~8℃冰箱中保存,平板保存时间通常为2~4周,瓶装及试管装培养基保存时间一般为3~6个月,具体效期应进行验证。每次使用培养基前,要观察颜色变化、流动性、均匀性、是否结块和是否污染等情况。如果发现培养基出现受潮、结块、其他性状明显改变的情况,应停止使用。
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