DNA的提取方法
DNA的提取可以简单的分为裂解和纯化两大步骤,裂解是破坏样品细胞结构,从而使样品中的DNA游离在裂解体系中的过程,纯化则是使DNA与裂解体系中的其它成分,如蛋白质、盐及其它杂质彻d分离的过程。下面让我们一起来看看DNA的提取方法都有什么吧!
一、高盐沉淀法
高盐沉淀法是酚氯仿抽提方法的一种变体,它简化了酚氯仿抽提的繁琐操作,并克服了其缺点,只是得到的DNA纯度不够稳定。
二、酚氯仿抽提法
酚氯仿抽提是一种有效的蛋白质去除方法,但如果裂解体系中的蛋白质含量超过了其饱和度,蛋白质就无法完q去除,需要进行多次反复抽提,而每次抽提都会导致核酸的损失。酚氯仿抽提的大优势在于成本低廉,对实验条件要求较低。
三、柱式法
过柱法利用特定的固相介质,在一定条件下,选择性地吸附核酸而不吸附蛋白质和盐,实现核酸与蛋白质及盐的分离。这是目前广泛使用的试剂盒提取方法。
离心柱法DNA提取具有比传统的酚氯法提取更高的纯度,有利于RNA保护,并且能够进行微量操作。由于其低廉的价格和相对便捷的操作,逐渐取代了传统的DNA提取方法,受到了高校科研等市场的广泛认可。
四、磁珠法
该方法将纯化介质包覆在纳米级磁珠表面,通过介质对DNA的吸附,利用外加磁场使DNA附着于磁珠并定向移动,从而实现核酸与其他物质的分离。磁珠法的优势在于提供高质量、高通量的核酸提取效果,满足现代对提取效率的需求;它具有高灵敏度(只需微量样本)、分离速度快(磁场分离仅需几秒钟)的特点。
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