常见缓冲液有什么
实验室中常常使用的各类溶液种类繁多,且配制方法五花八门,是否挑花眼了呢?本文总结了近三十种常用溶液、缓冲液、培养基的配制方法,涵盖了分子生物学、蛋白分析、细胞培养、微生物培养等各个领域。下面让我们一起来看看常见缓冲液有什么吧!
一、蛋白电泳缓冲液
蛋白电泳缓冲液种类非常之多,需要根据凝胶体系来进行选择。凝胶系统为Tris-甘氨酸体系时,可选择Tris-甘氨酸电泳缓冲液,凝胶系统为Bis-Tris体系时,可选择MES或MOPS缓冲液,当凝胶系统为Tris-tricine体系时,则选择Tricine缓冲液。
并且,蛋白电泳缓冲液分为变性与非变性缓冲液,区别在于变性缓冲液需加入SDS中和电荷。我们通常研究WB、IP时,使用变性缓冲液研究分子量大小即可,非变性缓冲液常用于研究蛋白空间结构、等电点等。
二、上样缓冲液
上样缓冲液(LoadingBuffer)是各类实验不可少的,可根据实验类型选择不同的Buffer,以下展示
DNA电泳LoadingBuffer、RNA电泳LoadingBuffer以及SDS-PAGELoadingBuffer的配制方法。
三、分子杂交常用溶液
分子杂交包含了核酸杂交和蛋白杂交,在实验过程中,各类常用溶液也是必不少的一环。使用膜杂交法时,可选择Denhardt's溶液,核酸杂交中变性和清洗,可选择SSC溶液、DNA变性缓冲液。
四、蛋白清洗、转膜常用溶液
蛋白分析的过程,少不了转膜液、清洗液的参与。WB转膜液用于将印迹从凝胶转印至膜上,TBST缓冲液可以用于WB、IF、IHC等实验中封闭液、一抗或二抗配制以及抗体孵育后的洗涤,WB封闭液则可用于减少非特异性抗体结合。TBST缓冲液TBST中含有Tris-HCl,NaCl,tween20这三种物质,是做WesternBlotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质,并且维持一个接近的天然环境。
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