肿瘤组织的原代细胞培养有哪些注意事项？

原代培养是直接从生物体组织或器官的一部分进行培养，也称初代培养。肿瘤组织的原代细胞培养技术为肿瘤研究及治疗提供充足的细胞来源是癌症在体外研究的重要工具，与体内研究相辅相成。但目前肿瘤细胞原代培养成功率不高的许多问题还需继续探讨与研究。肿瘤组织的原代细胞培养有哪些注意事项？让我们一起来看看吧！注意点一：取材部位的选择非常重要，应在癌细胞集中、细胞活力较好的部位取材，尽量避免在坏死区取材；注意点二：取材后应尽快培养，最好不要超过24h，如需耽搁时间，可将组织块于培养液中浸泡，放置...

查看更多

核酸提取(磁珠法)常见的六大问题

核酸提取的方法很多，如煮沸裂解法、酚氯仿抽法、浓盐法、阴离子去污剂法、异硫氰酸胍/苯酚法（Trizol法）、CTAB法原理（植物DNA提取经典方法）、离心柱纯化、磁珠法提取等，今天我们来看看核酸提取(磁珠法)常见的六大问题，从而更好的了解磁珠法提取核酸。Q：是不是误区越多，提取效果越好？A：不是，磁珠的主要特点是既可以分散于液体中，也可以在外加磁场作用下以固态方式和液相分离，ren何试剂体系，磁珠和液体的比例都应该是有一定阈值的，超过一定的比例，过多的磁珠将因为无法均匀分散于...

查看更多

Elisa的检测方法有哪些？

酶联免疫吸附测定（enzymelinkedimmunosorbentassay，简写ELISA或ELASA）指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上，利用抗原抗体特异性结合进行免疫反应的定性和定量检测方法。Elisa的检测方法有哪些？让我们一起来看看吧！常见的有直接法、间接法、竞争法基双抗夹心法，其中直接法和竞争法应用较少，应有最多的是双抗夹心法，让我们一一来看看它们是如何操作的吧！一、直接法将抗原固定于ELISA班上，然后用酶标抗体直检测抗原。相较于其他类型的ELI...

查看更多

如何利用流式进行细胞凋亡（Cell Apoptosis）分析

磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)是一种细胞膜活性物质，正常细胞中，其位于细胞膜脂质双层内侧,在细胞凋亡的早期，PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面。凋亡早期：磷脂膜(PS)外翻，但是细胞膜保持完整性，因此PI（与DNA结合）染色为阴性。AnnexinV是一种磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，可以与凋亡早期外翻的磷脂膜(PS)结合。凋亡中晚期：磷脂膜(PS)外翻，但是细胞膜被破坏，AnnexinV和PI分别与磷脂酰丝氨酸和DNA结合。坏死细胞...

查看更多

Lipo3000细胞转染的实验步骤及注意事项

细胞转染常用的转染试剂很多，其中，Lipo3000深受广大科研工作者的喜爱，那我们来看看Lipo3000细胞转染的实验步骤及注意事项吧！一、实验前准备Lipofectamine™3000转染试剂（ThermoFisher）、Opti-MEM（可以用无血清的培养基代替）二、实验步骤1.接种细胞，使其在转染时达到70–90%汇合度。注：对于HEK293，6孔板一般铺50万个细胞左右。对于PC9,24孔板一般铺5-10万个细胞。由于不同细胞，生长状况不太一样，需要根据情...

查看更多