细胞污染预防的种类和方法

细胞污染在细胞培养过程中，非常常见。目前为止，防止细胞污染的首要手段是预防。细胞污染通常会出现在生物安全柜和培养箱这两个地方，因此，如何做好这两个地方的预防措施呢？一、所有进入安全柜的东西都要尽可能保证无菌直接购买商用试剂和耗材是稳定的方式，如Gibco、中科百抗的血清，Corning的耗材等，这些品牌的试剂和耗材一般只要是正品都可以保证无菌。若自己配制的试剂，那么在配制中需要严格按无菌操作进行。二、分装的试剂建议过滤一次试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次，减少污染...

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细胞培养常用抗生素

抗生素在细胞培养中的使用可以最大限度地降低污染，从而降低细胞、试剂的费用损失和时间损失。因此，细胞培养常用抗生素有哪些呢？一、嘌呤霉素盐酸盐Puromycin,Dihydrochloride嘌呤霉素(Puromycin)是一种氨基糖苷类抗生素，能有效抑制革兰氏阳性菌生长，还能抑制原生生物、藻类、哺乳动物和昆虫细胞的生长，一般2天内能杀死99%的细胞。二、盐酸万古霉素VancomycinHydrochloride盐酸万古霉素(Vancomycinhydrochloride)是一...

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分子实验中DNA连接酶的作用机制

DNA连接酶(DNAligases)是一类重要的酶，在DNA复制、修复和重组过程中发挥关键作用。一、ATP依赖性连接在真核生物的连接酶如DNA连接酶I中，连接反应是ATP依赖性的。ATP的水解驱动了DNA链的连接。连接反应主要发生在DNA双链断裂的末端。T4DNA连接酶是典型的ATP依赖性连接：（1）原理与特点：T4DNA连接酶是一种来自噬菌体T4的连接酶，其主要原理是在DNA链断裂的末端引入磷酸二酯键，将两个DNA片段连接起来。它需要ATP作为辅助能量。（2）优点：T4DN...

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分子实验中DNA连接酶的作用原理

DNA连接酶(DNAligases)是一类重要的酶，在DNA复制、修复和重组过程中发挥关键作用。它们的主要功能是连接DNA链上的磷酸二酯键，形成完整的DNA双链。这一过程对于维持基因组的完整性和稳定性至关重要。DNA连接酶的基本作用原理是通过催化DNA链的连接，以形成连续的磷酸二酯骨架。连接过程通常包括以下三个步骤：（1）底物识别DNA连接酶识别DNA分子中需要连接的两个断裂部位(通常是5'末端和3'末端)。（2）磷酸基团的激活在连接前，DNA连接酶通常需要结合ATP(腺苷三...

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抗体抗原测定的Elisa方法

在医学临床、生物学研究上，用于测定各种各样的抗原、半抗原和抗体，Elisa法为杂交瘤细胞株的筛选提供了简便、灵敏、快速的测定方法。那让我们一起来看看抗体抗原测定的Elisa方法吧！抗体抗原测定的Elisa方法一：直接法1、将抗原吸附在固相载体表面；2、添加一种封闭试剂，防止检测抗体出现非特异性结合；3、添加直接偶联某种酶（如HRP）的检测抗体。该检测抗体将结合抗原，并且剩余的抗体会从孔中洗掉；4、添加这种酶的底物；5、短暂孵育后，在酶标仪上测定每个孔的信号。抗体抗原测定的El...

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