免费咨询热线:
4008883135

产品分类

Product Category

相关文章

Related Articles
产品中心
首页 > 产品中心 > > 实验试剂 > 原代肠癌条件重编程培养基

原代肠癌条件重编程培养基

简要描述:原代肠癌条件重编程培养基(Human intestine Carcinoma Conditional Reprogramming Medium)是一种为促进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的培养基。

  • 产品型号:型号齐全
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2022-06-24
  • 访  问  量:60
详情介绍

产品名称原代肠癌条件重编程培养基(Human intestine Carcinoma Conditional Reprogramming Medium)
产品说明原代肠癌条件重编程培养基Human intestine Carcinoma Conditional Reprogramming Medium是一种为促进人源肠癌原代细胞体外生长而开发的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和一定量的血清。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5%CO。、37℃培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以最佳人源肠癌原代细胞体外培养环境,选择性地促进体外人源肠癌原代细胞的生长。

产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明:
使用前准备
(1) 15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入生物安全柜中紫外照射30 min;提前30min4 ℃冰箱取出原代细胞培养基平衡至室温。

(2)γ 射线照射过的NIH-3T3细胞(40 Gy辐照)。
癌原代上皮细胞培养
1获取的人源肠癌原代细胞,按照表1中细胞数接种在合适的培养器皿中,加入y射线辐照后的NIH-3T3细胞(添加滋养细胞数量如表1和表2所示)。

2原代细胞初次接种后2-3天勿动(利于细胞贴壁),培养过程中若培养基颜色变黄但细胞未长满时可进行半换液,镜下观察细胞未长满但3T3细胞已不足时,适量补充γ射线辐照后的3T3细胞(一般补加初始数目的一半)。
针对实体瘤样本,细胞粒径大于12微米进行计数;倍增时间>48小时则定义为增殖较慢的细胞;对于增殖较快细胞,可以综合倍增时间、接种器皿的规格以及培养周期来估算接种的细胞数量;表格供参考,具体实验具体对待。
肠癌原代上皮传代
1)镜下观察细胞形成克隆,且汇合度85~95%时即可传代。

2)培养箱中取出细胞,弃旧培养液,0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽,再加入适量0.05%胰酶,37℃孵育,2~5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下观察细胞消化情况。
3)细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,1500 rpm,3min
4)弃上清,以1~5mL相对应的原代细胞培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板,加入γ射线辐照后的NIH-3T3细胞(不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量、添加滋养细胞数量如表1、表2所示)
5补加肠癌培养基至所需体积,十字交叉混匀,培养容器75%表面消毒后置培养箱,37℃5%CO2条件培养。其他步骤同上。
注意事项:

  1. 本产品在使用前需平衡至室温。

  2. 使用产品时应注意无菌操作,避免污染。

  3. 本产品中含有一定比例的血清和原代细胞专用抗生素,如无特殊需要不用额外再添加血清和抗生素,可直接使用。

  4. 样本需为肿瘤组织、内镜组织,且肿瘤细胞比例越高(>50%),培养成功率越高。

  5. 为保持本产品的最佳使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。

  6. 传代消化时切记不要消化过度,不宜超过5min,对细胞造成损伤,影响细胞状态。

  7. 请于保质期内使用本产品,超出保质期,必须放弃使用。

  8. 本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。


留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7