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原代口腔癌条件重编程培养基

简要描述:原代口腔癌条件重编程培养基(Human Oral Cancer Conditional Reprogramming Medium)是一种为促进口腔癌原代细胞体外生长而设计的培养基。

  • 产品型号:型号齐全
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2022-06-24
  • 访  问  量:106
详情介绍

产品名称原代口腔癌条件重编程培养基Human Oral Cancer Conditional Reprogramming Medium
产品说明原代口腔癌条件重编程培养基Human Oral Cancer Conditional Reprogramming Medium)是一种为促进口腔癌原代细胞体外生长而设计的培养基。它是一种无菌的液体混合系统,含有必需和非必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个理想平衡的营养环境,选择性地促进体外人口腔癌原代细胞的生长。

产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果宇临床数据接近

使用说明
使用前准备
(1) y射线照射过的NIH-3T3细胞(40Gy辐照)。
(2)15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。提前30min从4℃冰箱取出原代细胞培养基平衡至室温。

口腔癌原代细胞培
1)获取的人源口腔癌原代细胞,按照表1中细胞数接种在合适的培养器皿中,加入y射线辐照后的NIH-3T3细胞(添加滋养细胞数量如表1和表2所示)。
2)原代细胞初次接种后2-3 天勿动(利于细胞贴壁),培养过程中若培养基颜色变黄但细胞未长满时可进行半换液。
3)镜下观察细胞未长满但3T3细胞已不足时,适量补充y射线辐照后的3T3细胞(一般补加初始数目的一半)。

口腔癌原代细胞传代
1)镜下观察细胞形成克隆,且汇合度达到85~95%时即可传代。
2)培养箱中取出细胞,弃旧培养液,0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽,再加入适量0.05%胰酶,37℃孵育,2~5 min后拿出轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下观察细胞消化情况。
3)细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用原代细胞终止培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,1500 rpm, 3 min。
4)弃上清,以1~5mL相对应的原代细胞培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于培养瓶/板,加入y射线辐照后的NIH-3T3细胞(不同规格培养瓶/板底面积、接种原代细胞数量、添加滋养细胞数量如表1、表2所示),补加肠癌培养基至所需体积,十字交叉混匀,培养容器75%表面消毒后置培养箱,37℃、5%CO2条件培养。其他步骤同上。
注意事项:
1.本产品在使用前需平衡至室温。
2.使用产品时应注意无菌操作,避免污染。
3.本产品中含有原代细胞专用抗生素,如无特别需要不用额外再添加双抗,可直接使用。
4.为保持本产品的理想使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。5.请于保质期内使用本产品,超出保质期,必须放弃使用。
6.本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。


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