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产品型号:AM2001
更新时间:2025-04-27
厂商性质:代理商
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一、产品简介
英诺思(immuno-X)小鼠CD3/CD28激活磁珠用于激活小鼠T细胞,促进T细胞增值和T细胞分化。该产品利用三维立体磁珠模拟抗原呈递细胞对T细胞的激活,ActBeads TM提供的第一信号(CD3)和第二信号(CD28)使得T细胞高效扩增,避免T耗竭。
• ActBeads™ 激活磁珠浓度为4x107个/mL。
• 磁珠粒径均yi,流式细胞仪分析时可与T细胞明显区分
二、试剂盒组分
产品名称 | 存储条件 | 缓冲液成分 | 功能 |
ActBeads™ Mouse CD3/CD28 Activator | 4°C保存,避免冷冻 | PBS, 0.1% BSA | 通过磁珠偶联的CD3/CD28抗体激活T细胞,促进T细胞增值和分化 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
运输条件: 4°C运输
三、培养条件
·缓冲液:RPMI1640 培养基+10% FBS + 2 mM L-Glutamine+100 U/mL penicillin/streptomycin
·细胞因子:人或者小鼠的IL2
四、温馨提示
hIL2在人和小鼠细胞中具有同等活力
小鼠T细胞分离时,确保FACS Buffer渗透压稳定,小鼠免疫细胞非常敏感
IL7、IL15可与IL2联合使用,促进T细胞增值
五、实验步骤
1. 激活或者扩增T细胞
步骤 | 说明 |
1 | 分离小鼠T细胞,将其铺到96孔平底板中,细胞密度为8 x 104/孔,培养基200 μL |
2 | ActBeads™ 小鼠CD3/CD28激活磁珠震荡混匀后,加入到细胞中,2 μL/孔 Note: 激活T细胞时,ActBeads TM和细胞比例为1:1;诱导Treg细胞分化时,磁珠和细胞的比例应增加到2:1 |
3 | 加入IL2细胞因子,终浓度为100 U/mL |
4 | 进行T细胞培养,5% 二氧化碳,37℃ |
5 | 培养48-72小时后,T细胞体积变大,形态多样 |
6 | 当细胞密度较高时,更换新鲜培养基或者将细胞转移至新的培养板 |
2. T细胞重新刺激
通常T细胞在扩增到第7-10天时,需要通过添加新鲜的ActBeads™ 和IL-2进行多次重新刺激。经过反复重新刺激后,CD8+ T细胞仍保持细胞毒性。
步骤 | 说明 |
1 | 将T细胞重悬后置于无菌离心管中,在磁力架上吸附2分钟 |
2 | 倒出/吸出T细胞,进行细胞计数 |
3 | 将T细胞重新铺到培养板中,密度0.5–1 × 106 cells/mL |
4 | 培养,5% 二氧化碳,37℃ |
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