悬浮细胞培养的操作步骤与注意事项有哪些？

悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里，培养单细胞及小细胞团的组织培养系统，那么悬浮细胞培养的操作步骤与注意事项有哪些呢？让我们一起来看看吧！一、步骤1.将准备好的冻存细胞放入37℃水浴中解冻。2.用70%乙醇对顶端进行消毒，用吸管将细胞转移到含有5mlwan全MEM-10培养基的25cm2组织培养瓶中，轻轻摇动培养瓶，使细胞均匀分布于培养瓶中，放入5%CO2加湿培养箱中37℃培养过夜。3.将培养基吸出，用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆盖细胞，消化30~40...

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贴壁细胞培养的步骤有哪些？

在动物细胞培养过程中，必须有可以贴附的支持物表面，其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。那么贴壁细胞培养的步骤有那些呢？让我们一起来看看吧！1.将含有冻存细胞的安瓿放入37℃水浴中解冻。2.用70%乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有5ml起始培养基的25cm2组织培养瓶中，轻轻摇动培养瓶，使细胞均匀分布于培养瓶中，将其放入5%CO2加湿培养箱中37℃培养过夜。3.吸出起始培养基，换成适当的维持培养基。将细胞放回CO...

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如何确认RNA的质量？

样本种类繁多且复杂，有些样本，要想提取到质量良好的RNA是非常困难的，那么该如何确认RNA的质量呢？让我们一起来看看吧！确认RNA的质量有以下两种常见方法1）检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0时，我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的，不过要注意，当你用Tris作为缓冲液检测吸光度时，R值可能会大于...

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如何提高DNA纯度测定的准确性？

分子生物学实验中经常需要对样本进行浓度和纯度的测定，它相当于一种质控，以此来确保下游实验的结果可靠。那么该如何提高DNA纯度测定的准确性呢？让我们一起来看看吧！常用的DNA浓度/纯度测定设备是紫外分光光度计，它的原理是利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析物质成分。假设现在有一样物质A，它溶解在溶液内，当光照射溶液时，溶液内的A会吸收一部分的光。不同颜色的光有不同的波长，A对不同颜色的光（不同波长）的吸收程度是不一样的。双链的DNA，它能对波长为260nm的光进行强...

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常见的RNA提取方法

不同组织RNA提取原理是将细胞裂解，释放出RNA，并通过不同方式去除蛋白，DNA等杂质，最终获得高纯度RNA产物的过程。那么你知道常见的RNA提取方法有什么吗？让我们一起来看看吧！一、酚氯仿抽提（有机试剂抽提）原理：将被裂解的生物样本，混匀离心分相以后，RNA在上层水相，DNA，蛋白质在中间层，下层有机相。收集水相加入乙醇或异丙醇可沉淀RNA，漂洗后得到RNA。优点：得率高、可提取到含miRNA和其他小RNA在内的总RNA。缺点：用到苯酚、氯仿等有毒试剂。二、硅胶柱法抽提原理...

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