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WesternBlot虽是实验室zui常用的蛋白分析技术,但是由于它步骤繁琐、操作流程长、影响因素多,所以导致在实验过程中会遇到各式各样的问题,那么你知道WB实验常见问题有哪些呢?该如何解决呢?让我们一起来看看吧!一、目标条带没有信号原因分析:1.样品中可能含有蛋白酶,使蛋白样品分解成小分子。2.目标蛋白浓度过低(低于检测下线)。3.转膜时间太短导致目标蛋白没有充分转移到膜上,或者转膜时间过长导致样品转穿。4.一抗的特异性不佳,导致一抗无法识别目标蛋白。解决方法:1.添加蛋白...
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RNA是目前发现细胞内生物功能zui丰富多样的生物大分子,同时是DNA与蛋白质信息传递的桥梁,因此完整RNA的提取和纯化是功能基因组时代的重要手段,那么你知道RNA提取的实验步骤是什么吗?让我们一起来看看吧!以Trizol法提取组织细胞为例:1.提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5~106个细胞加1mlTrizol后,反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞;2.将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30℃下放置5分钟;3.在上述EP管中,按照每1mlTri...
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RNA是目前发现细胞内生物功能zui丰富多样的生物大分子,同时是DNA与蛋白质信息传递的桥梁,因此完整RNA的提取和纯化是功能基因组时代的重要手段。那么你知道RNA提取成功的要点有哪些吗?让我们一起来看看吧!1.组织样本要尽可能的新鲜,避免反复冻融。2.提取时组织要充分研磨,组织量不宜过少,更不宜过多。3.加入裂解液后应给予充分的孵育时间,使样本充分裂解。4.在用Trizol法提取时,分层后吸取上清的原则是“宁愿少吸,不能多吸”,千万不能提取到中间层,否则会导致严重的基因组D...
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Alzet渗透泵2002是一种小型、可植入式的胶囊渗透泵,可应用于小鼠、大鼠及其他实验动物研究。该泵无需进行外部连接或频繁处理,就能以恒定的速率持续给药1天到14天的时间。Alzet渗透泵2002泵送率为0.5μl/hr(±0.1μl/hr),持续时间为14天,泵容量为200μl。Alzet渗透泵2002由3个组件组成,分别是:灌注管(fillingtube)、流量调节器(flowmoderator)、泵(pumpbodymaterials)。为了更好的使用Al...
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Alzet渗透泵(ALZETOsmoticPump),又名为Alzet植入式胶囊渗透压泵,是一种高效动物给药系统。Alzet渗透泵体积小巧,常用于大鼠、小鼠及其他实验动物的药剂泵送。Alzet渗透泵共有12个型号的产品,可根据给药时间、给药速度来选择合适的型号,具体的产品型、泵容积、泵送速率见下表:Alzet渗透泵可植入动物的皮下或者腹腔内,亦可连接上导管,输送到动脉或者静脉内,从而到达局部组织或者器官,从历年的文献来看,科学家们已经将Alzet渗透泵应用到了如脑、脊髓、肝脏...
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