蛋白质凝胶电泳的原理是什么？有何注意事项？

你知道蛋白质凝胶电泳的原理是什么吗？有何注意事项？让我们一起来看看吧！一、原理将蛋白质样品同离子型去垢剂十二烷基*（SDS)以及硫基乙醇一起加热，使蛋白质变性，多肽链内部的和肽链之间的二硫键被还原，肽链被打开。打开的肽链考疏水作用与SDS结合而带负电荷，电泳时在电场作用下，肽链在凝胶中向正极迁移。不同的肽链由于在迁移时受到的阻力不同，在迁移过程中逐渐分开，其相对迁移率与分子量的对数间成线性关系。二、注意事项1.由于与凝胶聚合有关的硅橡胶称、玻璃板表面不光滑洁净，在电泳时会造成...

查看更多

蛋白质含量测定方法有哪些？

蛋白质含量测定实验可以用于测定蛋白质浓度和检测所提取的蛋白质含量，那么蛋白质含量测定方法有哪些呢？让我们一起来看看吧！一、folin—酚试剂法这种蛋白质测定法是zui灵敏的方法之一。过去此法是应用zui广泛的一种方法，由于其试剂的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即folin-酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产生深兰色的原因是：在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物...

查看更多

悬浮细胞培养的操作步骤与注意事项有哪些？

悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里，培养单细胞及小细胞团的组织培养系统，那么悬浮细胞培养的操作步骤与注意事项有哪些呢？让我们一起来看看吧！一、步骤1.将准备好的冻存细胞放入37℃水浴中解冻。2.用70%乙醇对顶端进行消毒，用吸管将细胞转移到含有5mlwan全MEM-10培养基的25cm2组织培养瓶中，轻轻摇动培养瓶，使细胞均匀分布于培养瓶中，放入5%CO2加湿培养箱中37℃培养过夜。3.将培养基吸出，用0.5ml37℃的胰酶/EDTA覆盖细胞，消化30~40...

查看更多

贴壁细胞培养的步骤有哪些？

在动物细胞培养过程中，必须有可以贴附的支持物表面，其依靠自身分泌或培养基中的贴附因子才能在该表面生长增殖的离体动物的培养细胞。那么贴壁细胞培养的步骤有那些呢？让我们一起来看看吧！1.将含有冻存细胞的安瓿放入37℃水浴中解冻。2.用70%乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有5ml起始培养基的25cm2组织培养瓶中，轻轻摇动培养瓶，使细胞均匀分布于培养瓶中，将其放入5%CO2加湿培养箱中37℃培养过夜。3.吸出起始培养基，换成适当的维持培养基。将细胞放回CO...

查看更多

如何确认RNA的质量？

样本种类繁多且复杂，有些样本，要想提取到质量良好的RNA是非常困难的，那么该如何确认RNA的质量呢？让我们一起来看看吧！确认RNA的质量有以下两种常见方法1）检测RNA溶液的吸光度280、320、230、260nm下的吸光度分别代表了核酸、背景（溶液浑浊度）、盐浓度和蛋白等有机物的值。一般的，我们只看OD260/OD280（Ratio，R）。1.82.0时，我们认为RNA中蛋白或者时其他有机物的污染是可以容忍的，不过要注意，当你用Tris作为缓冲液检测吸光度时，R值可能会大于...

查看更多