【干货】一文了解vero细胞培养全流程

Vero细胞系是连续非整倍体细胞，连续细胞系可以经过多次分裂而不衰老，非整倍体是指细胞中的染色体数目与通常的不同。与其它普通哺乳动物细胞不同，Vero细胞还有干扰素分泌缺陷的特点，当被病毒感染时，它不能分泌干扰素，但它仍然具有α/β-干扰素的受体，所以对于其它来源的干扰素仍有正常的反应。一、基本信息细胞名称：Vero非洲绿猴肾细胞细胞别称：VERO;Verdareno细胞形态：上皮细胞样生长特性：贴壁生长组织来源：正常肾培养基：MEM+10%FBS+1%PS生长条件：①气相：...

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原代细胞培养的分离注意事项有什么？

分离是原代细胞培养的重要步骤之一，那么你知道原代细胞培养的分离注意事项有什么吗？让我们一起来看看吧！一、组织块培养法1.组织块接种后的前3天，在观察和移动的过程中，注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动，否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。2.加入的培养液不宜过多，避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。3.当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的细胞，它们产生的有毒物质会影响原代细胞的生长。4.为促进组织块尽快粘贴在培养瓶皿上，可以在种植前...

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原代细胞取材的注意事项有哪些？

取材作为原代细胞培养过程中至关重要的一步，那么原代细胞取材的注意事项有哪些呢？让我们一起来看看吧！一、皮肤和粘膜主要取皮片，面积一般2~4平方厘米。二、内脏和实体瘤1.无菌环境；2.熟悉所需组织的类型和部位；3.要避开破溃、坏死液化部分，以防污染，尽量去除混杂的结缔组织。三、血液细胞一般多抽取静脉外周血，或从淋巴组织中(如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等)分离细胞，取材时应注意抗凝。四、骨髓、羊水、胸/腹水细胞严格无菌，注意抗凝，还要尽快分离培养，离心后，用无钙、镁PBS洗两次，再...

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WB实验常见问题有哪些？如何解决？

WesternBlot虽是实验室zui常用的蛋白分析技术，但是由于它步骤繁琐、操作流程长、影响因素多，所以导致在实验过程中会遇到各式各样的问题，那么你知道WB实验常见问题有哪些呢？该如何解决呢？让我们一起来看看吧！一、目标条带没有信号原因分析：1.样品中可能含有蛋白酶，使蛋白样品分解成小分子。2.目标蛋白浓度过低（低于检测下线）。3.转膜时间太短导致目标蛋白没有充分转移到膜上，或者转膜时间过长导致样品转穿。4.一抗的特异性不佳，导致一抗无法识别目标蛋白。解决方法：1.添加蛋白...

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你知道RNA提取的实验步骤是什么吗？

RNA是目前发现细胞内生物功能zui丰富多样的生物大分子，同时是DNA与蛋白质信息传递的桥梁，因此完整RNA的提取和纯化是功能基因组时代的重要手段，那么你知道RNA提取的实验步骤是什么吗？让我们一起来看看吧！以Trizol法提取组织细胞为例：1.提取细胞RNA时，先离心沉淀细胞，每5~106个细胞加1mlTrizol后，反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞；2.将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中，在室温15~30℃下放置5分钟；3.在上述EP管中，按照每1mlTri...

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