技术文章
当前位置:首页
技术文章
13
你知道什么是原代细胞培养,和细胞生长曲线吗?,让我们一起来看看吧!一、原代细胞培养原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的shou次培养,也叫初代培养。原代培养离体时间短,遗传性状和体内细胞相似,适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。一、细胞生长曲线细胞生长曲线是测定细胞绝对...
查看更多12
对照的目的是对检测的各个环节进行监控,因此我们按照检测的流程对对照进行梳理。那么我们应该如何选择荧光定量PCR中的对照呢?让我们一起来看看吧!一、阳性对照和阴性对照阳性对照和阴性对照是指在相同的处理条件下,比如一份已知的感染样品和一份已知的未感染样品,都进行了提取和扩增最终获得了阳性结果和阴性结果。阴阳性对照强调处理过程与样品一致,并且有明确的预期结果。二、扩增对照我们通常说的阳性对照和阴性对照指的是扩增试剂盒中附带的不需要提取的阳性对照和阴性对照,更准确的定义应该是扩增阳性...
查看更多12
荧光定量PCR(Real-timePCR),是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。那么你知道荧光定量PCR的应用吗?让我们一起来看看吧!一、分子生物学研究1.核酸定量分析:对传染性疾病进行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的检测,比如近期流行的甲型H1N1流感,转基因动植物基因拷贝数的检测,RNAi基因失活率的检测等。2.基因表达差异分析:比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差...
查看更多11
细胞低温冻存是培养室常用技术。那么你知道细胞冻存的原理和实验步骤吗?让我们一起来看看吧!原理:将细胞放在-196℃液氮中,可以使细胞暂时脱离生长状态,减少细胞代谢,理论上储存时间几乎是无限的。最佳的冷冻条件是尽可能地降低细胞内的晶体形成,减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤。上述要求可通过下列方法获得:1.缓慢冷冻,使细胞内水分离开细胞,但不可太慢,以避免冰晶形成;2.用亲水的低温保护剂排除水分;3.在尽可能低的温度下保存细胞,降低高浓度盐对冰中蛋白质变性的...
查看更多11
细胞低温冻存是培养室常用技术。原理是将细胞放在-196℃液氮中,可以使细胞暂时脱离生长状态,减少细胞代谢,理论上储存时间几乎是无限的。那么细胞冻存有何注意事项呢?让我们一起来看看吧!一、DMS0稀释时会释放大量热量,不能直接加到细胞液中,须事先配制,且DMSO必须是细胞培养级别的;二、缓慢冷冻,细胞逐步脱水,不会因产生大的冰晶而受到损害;三、选择细胞生长良好、密度约为80-90%、活力达90%以上的细胞冻存;四、冻存时细胞密度少于5X105个活细胞/mL时,很难成功复苏;五、...
查看更多