DNA质粒提取的原理是什么？

在没有质粒提取试剂盒之前，大多提取质粒都是自己配置试剂来提取大肠杆菌中的质粒。现在的试剂盒只是改了一个名字而已，试剂还是那几个试剂。用的原理还是那个原理：碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。那么你知道DNA质粒提取的原理是什么吗？让我们一起来看看吧！一、为什么用无水乙醇沉淀DNA？用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇不与核酸起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。D...

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细胞复苏有何注意事项？

细胞复苏是指将冻存在液氮或者-70℃冰箱中的细胞解冻之后重新培养，细胞恢复生长的过程。那么你知道在细胞复苏过程中有何注意事项吗？让我们一起来看看吧！1.取冻存细胞时应做好防护措施，戴好防冻手套，护目镜。如果冻存管密封不严，液氮可被吸入。由于解冻时冻存管中的气温急剧上升，将可能发生爆炸。2.细胞放入水浴中复苏时注意用镊子夹住细胞冻存管并在水浴中不时晃动，使其受热均匀，且速度越快越好，这样可以最大限度的保存细胞活力，并防止水浴锅的水进入细胞冻存管造成细胞污染。3.打开细胞冻存管之...

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什么是原代细胞培养和细胞生长曲线？

你知道什么是原代细胞培养，和细胞生长曲线吗？，让我们一起来看看吧！一、原代细胞培养原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的shou次培养，也叫初代培养。原代培养离体时间短，遗传性状和体内细胞相似，适于做细胞形态、功能和分化等研究。较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。一、细胞生长曲线细胞生长曲线是测定细胞绝对...

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如何选择荧光定量PCR中的对照？

对照的目的是对检测的各个环节进行监控，因此我们按照检测的流程对对照进行梳理。那么我们应该如何选择荧光定量PCR中的对照呢？让我们一起来看看吧！一、阳性对照和阴性对照阳性对照和阴性对照是指在相同的处理条件下，比如一份已知的感染样品和一份已知的未感染样品，都进行了提取和扩增最终获得了阳性结果和阴性结果。阴阳性对照强调处理过程与样品一致，并且有明确的预期结果。二、扩增对照我们通常说的阳性对照和阴性对照指的是扩增试剂盒中附带的不需要提取的阳性对照和阴性对照，更准确的定义应该是扩增阳性...

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你知道荧光定量PCR的应用吗？

荧光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团，通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。那么你知道荧光定量PCR的应用吗？让我们一起来看看吧！一、分子生物学研究1.核酸定量分析：对传染性疾病进行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的检测,比如近期流行的甲型H1N1流感，转基因动植物基因拷贝数的检测，RNAi基因失活率的检测等。2.基因表达差异分析：比较经过不同处理样本之间特定基因的表达差...

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