这些测序方法，你知道吗？

测序，测的是DNA的序列，也就是测定DNA中脱氧核糖核苷酸的排列顺序，它是将DNA化学信号转变为计算机可处理的数字信号的一个过程，我们能从这些经过科学计算得出的数字信号中找寻到生命之间的奥秘。根据测序技术出现的时间以及读长、通量等特征，分为一代测序、二代测序、三代测序。下面的这些测序方法，你知道吗？让我们一起来看看吧！一、一代测序一代测序技术，也被称为Sanger测序。其利用了双脱氧核苷酸会终止PCR的原理。比如：一条序列为ATCGCTA，我们进行3次的双脱氧核苷酸，第一次加...

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NGS测序之文库构建

由于二代测序读长的限制，不可能一下将一个很长的基因序列测通，因此需要先将长基因序列随机片段化成小片段，这样的话，这些片段就可以覆盖整个基因组。所以需要构建文库。一、文库构建的步骤文库构建大致步骤类似，但是各有各自du特的点，例如，RNAseq里miRNA，lncRNA，mRNA方法各有差异，具体方法以后有机会再补充。这里以Illumina的PE文库为例，其流程图如下图。二、文库构建详细步骤（1）DNA片段化（FragmentDNA）使用超声、酶或者加热的方式将DNA样品打碎成...

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NGS测序为什么需要文库构建?

NGS即Next-generationsequencing，又叫第二代测序技术或者高通量测序技术或者下一代测序技术。文库是DNA/RNA样本在测序前做的一系列准备，因为原始的核酸样本无法直接用于测序，只有经过处理的样本才能满足测序平台的要求，比如在DNA样本两端添加测序bi备的接头；样本量不足时，可以通过PCR扩增达到上机的要求等。NGS测序为什么需要文库构建?让我们一起来看看吧！一、DNA文库构建的内容（1）片段化及末端修复（2）加接头（3）PCR注意：此处忽略磁珠纯化的步...

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冻存细胞后续如何处理？

冻存细胞在收到货后，后续如何进行处理呢？如何复苏呢？一文让你了解清楚！一、收到冻存细胞如何处理收到冻存细胞后，请打开包装箱，检查箱内干冰是否充足，冻存管是否融化，若已经融化，请拍照留存，并联系客服，若无异常，请及时将冻存管置于超低温冰箱内保存，若长时间不使用，必须在超低温冰箱内过夜后转移至液氮中保存。二、冻存细胞如何复苏取100mm培养皿并做好标记，加入预热好的12ml完quan培养基，将冻存管放入37℃水浴锅中，轻轻摇晃冻存管，待细胞悬液完quan溶解后，转移至安全柜中操作...

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细胞稳定转染和瞬时转染有哪些区别？

在细胞实验中，细胞转染是一项常用的技术，用于引入外源基因、表达蛋白或沉默目标基因等。其中，细胞的稳定转染和瞬时转染是两种常见的转染方式。细胞稳定转染和瞬时转染有哪些区别？让我们一起来看看吧！类别特点适用范围稳定转染长期稳定表达目标基因长期功能研究和稳定表达需求的实验可通过筛选和扩增获得稳定表达的细胞系长期细胞培养和细胞系建立使用脂质体、病毒载体或DNA转染等方法大规模蛋白表达和基因敲入研究瞬时转染快速实现临时的基因表达短期功能研究和临时表达需求的实验无需筛选和扩增细胞系短期细...

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