细胞培养常用抗生素

抗生素在细胞培养中的使用可以最大限度地降低污染，从而降低细胞、试剂的费用损失和时间损失。因此，细胞培养常用抗生素有哪些呢？一、嘌呤霉素盐酸盐Puromycin,Dihydrochloride嘌呤霉素(Puromycin)是一种氨基糖苷类抗生素，能有效抑制革兰氏阳性菌生长，还能抑制原生生物、藻类、哺乳动物和昆虫细胞的生长，一般2天内能杀死99%的细胞。二、盐酸万古霉素VancomycinHydrochloride盐酸万古霉素(Vancomycinhydrochloride)是一...

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分子实验中DNA连接酶的作用机制

DNA连接酶(DNAligases)是一类重要的酶，在DNA复制、修复和重组过程中发挥关键作用。一、ATP依赖性连接在真核生物的连接酶如DNA连接酶I中，连接反应是ATP依赖性的。ATP的水解驱动了DNA链的连接。连接反应主要发生在DNA双链断裂的末端。T4DNA连接酶是典型的ATP依赖性连接：（1）原理与特点：T4DNA连接酶是一种来自噬菌体T4的连接酶，其主要原理是在DNA链断裂的末端引入磷酸二酯键，将两个DNA片段连接起来。它需要ATP作为辅助能量。（2）优点：T4DN...

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分子实验中DNA连接酶的作用原理

DNA连接酶(DNAligases)是一类重要的酶，在DNA复制、修复和重组过程中发挥关键作用。它们的主要功能是连接DNA链上的磷酸二酯键，形成完整的DNA双链。这一过程对于维持基因组的完整性和稳定性至关重要。DNA连接酶的基本作用原理是通过催化DNA链的连接，以形成连续的磷酸二酯骨架。连接过程通常包括以下三个步骤：（1）底物识别DNA连接酶识别DNA分子中需要连接的两个断裂部位(通常是5'末端和3'末端)。（2）磷酸基团的激活在连接前，DNA连接酶通常需要结合ATP(腺苷三...

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抗体抗原测定的Elisa方法

在医学临床、生物学研究上，用于测定各种各样的抗原、半抗原和抗体，Elisa法为杂交瘤细胞株的筛选提供了简便、灵敏、快速的测定方法。那让我们一起来看看抗体抗原测定的Elisa方法吧！抗体抗原测定的Elisa方法一：直接法1、将抗原吸附在固相载体表面；2、添加一种封闭试剂，防止检测抗体出现非特异性结合；3、添加直接偶联某种酶（如HRP）的检测抗体。该检测抗体将结合抗原，并且剩余的抗体会从孔中洗掉；4、添加这种酶的底物；5、短暂孵育后，在酶标仪上测定每个孔的信号。抗体抗原测定的El...

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Elisa检测之组织样本的处理方法

Elisa是一种快速、灵敏、准确可靠的定性定量分析方法。样本的处理对于Elisa实验的成功起着关键的作用。组织样本一般制成组织匀浆，处理方法如下：(1)使用干净的工具解剖目标组织，尽快置于冰上，以防被蛋白酶降解。（暂时不处理的组织，置于圆底微量离心管中，浸入液氮中“速冻”，在-80℃下存储样品备用）。(2)用预冷的PBS缓冲液（0.01M，pH=7.4）洗涤组织去除残留的血液，称重后备用。若组织块较大，需先剪碎。(3)在冰上用研磨缓冲液（常用PBS缓冲液，但最好使用50mMT...

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