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TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时,5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。PC...
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SNaPshot基因分型技术是由美国ABI公司开发的一种基于荧光标记单碱基延伸链终止反应原理的分型技术,主要针对中小通量的SNP分型项目。简单说来,在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临SNP位点5’-端的不同长度延伸引物和模板DNA的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI3730XL测序仪检测后,根据峰的位置确定该延伸产物对应的SNP位点,而根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。同时,通过多重PCR反应体系,可以同时检测多种SNP位点,通常...
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质谱法基因分型技术简介DNA质谱阵列基因分析系统以其通量高、自动化、灵活、结果准确、实验成本低廉等诸多优势成为了大学、医学生物学研究所、生物技术公司、制药企业、疾控中心等机构所推崇的研究工具。应用领域涵盖医学及转化医学、分子生物学、基因组学、表观遗传学、农业遗传育种及转基因技术等相关领域。检测仪器信息SequenomMassArray时间飞行质谱生物芯片系统是为基因组学研究提供兼顾灵敏度和特异服务的中高通量技术平台,广泛地应用于遗传突变检测、SNP分型以及DNA甲基化定量分析...
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KASP基因分型介绍KASP(KompetitiveAllele-SpecificPCR),即竞争性等位基因特异性PCR,原理上与TaqMan检测法类似,都是基于终端荧光信号的读取判断,每孔反应都是采用双色荧光检测一个SNP位点的两种基因型,不同的SNP对应着不同的荧光信号。KASP技术与TaqMan法类似,它与TaqMan技术不同的是,它不需要每个SNP位点都合成特异的荧光引物,它基于*的ARMPCR原理,所有的位点检测终都可以使用通用荧光引物进行扩增,这降低了KASP技术...
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