Western-blot 实验原理、实验步骤及试剂选择指南

Western，也称Westernblot、Westernblotting、Western印迹，是用抗体检测蛋白的常用的方法之一。本文分别介绍western的实验原理、实验步骤以及试剂选择指南。实验原理：Western技术是通过聚丙烯酰胺凝胶电泳后，经PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第...

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实验室常用细胞株简介

细胞株名称ATCC编号细胞来源细胞种类生长状态293CRL-1573人胎肾贴壁、上皮样2215无人肝癌贴壁、上皮样127TAgCRL-2817小鼠多能胚胎干细胞胚胎型293/CHE-FcCRL-2368人肾上皮细胞、贴壁3T3-L1CL-173小鼠胚胎成纤维成纤维3T6CCL-96小鼠胚胎成纤维细胞、贴壁A431CRL-1555人表皮细胞癌上皮细胞、贴壁A549CCL-185人肺癌贴壁、上皮样A9CRL-6319小鼠结缔组织成纤维细胞、贴壁AR42JCRL-1492大鼠胰腺肿...

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原代细胞的培养与建系

细胞的来源多样，培养方法也各不相同，凡是来源于胚胎、组织器官及外周血，经特殊分离方法制备而来的原初培养的细胞称之为原代细胞。原代细胞经分散接种之手段称为传代。凡能经传代方式进行再次培养的细胞称为传代细胞。若能稳定生长传10~20代以上的细胞可确立为细胞系。若有条件能开展单细胞克隆、纯化，经大量扩增后所形成的生物学特性稳定的克隆化细胞群，称之为细胞株或克隆细胞。此过程称为细胞的纯化或细胞克隆。这些基本技术是从事细胞培养工作的基础，只有熟悉和掌握了基本技术,才可能更快捷地学习和掌...

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