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2019-222
原理介绍Biacore是基于表面等离子共振(SPR)原理开发的新型生物分析传感技术,进行实时,无标记互作分析。该技术的关键是利用基于SPR现象发展的生物传感器作为检测系统。一般情况下,当入射光以临界角入射到两种不同透明介质的界面时将产生全反射,且反射光强度在各个角度上都应相同。但若在介质表面上镀一层金属薄膜后,由于入射光可引起金属中自由电子的共振,从而导致反射光在一定角度内大大减弱,其中使反射光*消失的角度称作共振角(SPRAngel)。共振角会随金属薄膜表面通过的液相的折射...
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2019-222
数字PCR突变检测介绍数字PCR(digitalPCR,dPCR)通过将微量样品进行微滴化处理,即稀释和分液,直每个细分样品中所含有的待测分子数一般不超过1(0或1)个,将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴。再将所有微量样品在相同条件下进行PCR扩增反应,使含有目标分子的微量样品中的目标分子增加成千上万倍,产生强的荧光信号,后对发生了扩增反应的微量样品进行统计,有荧光信号的微滴判读为1,没有荧光信号的微滴判读为0,根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶...
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2019-221
TaqMan探针法是针对DNA上的SNP位点设计PCR引物和TaqMan探针,进行实时荧光PCR扩增检测的方法,通常用于少量SNP位点的分析,核酸定量分析以及肿瘤细胞突变分析等。探针的5’-端和3’-端分别标记一个荧光报告基团(Reporter,如FAM、VIC、HEX等)和一个荧光淬灭基团(Quencher,如TAMRA、BHQ1等)。当荧光探针保持完整时,5′-端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号。PC...
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2019-221
2019-221
SNaPshot基因分型技术是由美国ABI公司开发的一种基于荧光标记单碱基延伸链终止反应原理的分型技术,主要针对中小通量的SNP分型项目。简单说来,在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临SNP位点5’-端的不同长度延伸引物和模板DNA的反应体系中,引物延伸一个碱基即终止,经ABI3730XL测序仪检测后,根据峰的位置确定该延伸产物对应的SNP位点,而根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类,从而确定该样本的基因型。同时,通过多重PCR反应体系,可以同时检测多种SNP位点,通常...
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