WB-考马斯亮蓝染色法

一、考马斯亮蓝结构考马斯亮蓝R-250和G-250染料是二磺酸化三苯基甲烷化合物的两种化学形式，结构上R-250比G-250少了2个甲基。二、蛋白质染料要求用染料和生物大分子结合形成有色的复合物是电泳后检测常用的方法。选用染料通常应考虑以下要求：1.必须与大分子结合以形成一个不溶性的，有色的，紧密的复合物，但不结合到凝胶中和支持膜上，以便从凝胶中除去，否则高背景会影响蛋白带的辨别和定量扫描。2.染料必须容易溶解在对大分子没有影响的溶剂中，以利于背景的脱色。3.选用高吸光系数的...

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细胞冻存的小Tips

细胞冻存是细胞培养中的关键环节，直接影响细胞存活率和活力，关系到后续细胞实验能否按照计划有效地进行。掌握好细胞冻存的小Tips，有助您做好细胞培养式样，让我们一起来看看吧！一、细胞冻存的基本原则细胞冻存遵循“慢冻”原则：让细胞在超低温环境中缓慢进入“冬眠”状态，暂时停止其代谢活动。目的是保存细胞样本，方便复苏。二、细胞冻存的注意事项1.温度控制不稳定可能导致细胞存活率降低二甲基亚砜（DMSO）或甘油常作为冷冻保护剂，保护细胞。DMSO能快速穿透细胞膜进入细胞，降低冰点，延缓冻...

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Elisa试剂盒怎么选？

在选择ELISA试剂盒时，不同的用户往往有不同的选择标准，无论是灵敏度、样本类型还是简便性，核心标准是ELISA试剂盒的重现性。一、试剂盒的应用种属、检测样本的种类一般来说，生产厂家都会在产品名称上标明种属，ELISA试剂盒种属:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待检样本种类：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆等。二、试剂盒的检测范围就是标准曲线范围，特别要注意待测样本浓度是否落在标准曲线范围内，对于高浓度样本，需要先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。三...

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小鼠给药操作

一、实验小鼠的选择挑选实验小鼠一般都是根据实验要求来筛选品系、品种，在小鼠年龄、体重、生理健康等方面要格外注意。基本上只要满足以下注意事项，就能挑选到合适满意的小鼠。1、首先要考虑小鼠是否符合国家标准。2、按照实验目的和要求来选择。3、不同季节和昼夜不同时间，动物机体反应性有一定改变4、不同种、同种而不同品系的小鼠对同一实验处理反应有很大差别。5、年龄应尽可能一致，体重应大致相近，一般不应相差10%。6、小鼠性别，在实验研究中，如无特殊要求，一般宜雌雄各半，以避免由于性别差异...

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His-tag的由来

组氨酸标签也称His-tag，是一种简单、应用广泛的纯化标签，具有六个或更多连续的组氨酸残基，其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能构成表位利于检测；二是构成的结构特征（结合配体）利于纯化。His标签我们经常会看到，做蛋白亲和纯化的小伙伴们应该就没有没听过His名号的吧。可是它究竟从何而来呢？一、起源1975年,J.Porath等人的研究论文中，实验者将金属螯合亲和层析（简称MCAC）技术应用于蛋白分离。研究者首先将金属离子（如Cu2+、Ni2+等）固定到IDA-衍生的凝胶...

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