一步法RT-qPCR实验优化小技巧

常见的RT-qPCR流程一般分为RNA提取，逆转录、荧光定量PCR三个步骤，当有的课题需要对某物种进行多种处理后，检测某个基因的表达水平，以验证该基因应对不同胁迫压力的耐受力；或者经某种病原菌侵染后，检测寄主不同基因的表达水平，以探究可能涉及的通路及互作机理等……对于这几类样本数量较大，但样本只需要检测一次的实验方案，我们常常推荐一步法RT-qPCR，即逆转录与荧光定量PCR配制一管体系，只需一次上机即可完成表达量的检测。由于将RNA逆转录与荧光定量PCR的体系配制合为一步，...

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石蜡切片Protocol实验需要注意哪些要点呢？

石蜡切片是一种常见的组织学技术，用于观察组织的微观结构。在进行石蜡切片实验时，有许多细节需要注意，这些细节往往决定了切片的质量和结果的准确性。那么石蜡切片Protocol实验需要注意哪些要点呢？本期内容将为你揭示一些关键的细节，助你获得最佳的石蜡切片效果。1.组织固定1）取新鲜组织，分割块的大小，宜小不宜大，一般不超过1cm3，用预冷的PBS冲洗，置于10%的福尔马林固定液中固定24小时。2）取出组织，蒸馏水冲洗30分钟。2.组织脱水，包埋，切片1）自动脱水：设定脱水程序，7...

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细胞贴壁不均匀的原因有哪些呢？

在培养贴壁细胞的时候，偶尔会出现细胞接种后贴壁不均匀的情况。有的地方长得非常密集，有的地方却太稀疏。虽然这对于常规培养并不算大问题，但有时则可能影响后续的实验进程。所以一旦遇到贴壁不匀，建议排查原因并优化操作方案。那么，造成细胞贴壁不均匀的原因有哪些呢？本期内容一起来跟着小编的脚步学习一下吧！情况一：局部生长密集，密集处呈不规则分布原因：一般是接种时没有混匀，或者细胞传代时没有消化che底从而形成细胞团块导致的解决方案：继续培养1-2天，待细胞状态稳定后，重新消化接种，接种时...

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原代细胞分离的原理

原代细胞分离培养是一项实验技术，它涉及从生物体中提取组织或细胞，并将它们转移到体外环境中进行培养。这些来源包括各种组织器官、外周血和胚胎等。在培养过程中，原代细胞的生长速度相对较慢，通常在培养的10代内停止生长。因此，通常将培养的细胞归类为原代细胞培养，这些细胞包括第1到第10代的细胞。下面让我们一起来看看原代细胞分离的原理吧！实验原理：原代细胞保持了体内原始细胞的生物学特性，接近于体内的生长特性。因此，它们为研究生物体细胞的生长、代谢和繁殖提供了有力的工具。此外，原代细胞培...

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为什么要选择无血清的间充质干细胞培养基呢？

间充质干细胞是一种具有多向分化潜能的细胞，能够分化成多种类型的细胞，包括骨、软骨、脂肪、肌肉等。因此，它们在组织工程和再生医学领域具有广泛的应用前景。然而，要实现这些应用，首先需要获得足够数量的间充质干细胞，并且这些细胞必须保持其分化潜能和生物活性。间充质干细胞培养基通过提供必要的营养物质、生长因子和其他关键成分，为间充质干细胞的生长和分化提供了有力的支持。这些成分能够模拟体内环境，使间充质干细胞在体外培养中能够正常增殖和分化，同时保持其多向分化潜能。现如今。市面上出现了很多...

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