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原代乳腺上皮细胞完全培养基

简要描述:原代乳腺上皮细胞完全培养基(Human Mammary Epithelial Cell Medium)是一种促进人乳腺原代上皮细胞体外生长的培养基。

  • 产品型号:型号齐全
  • 厂商性质:代理商
  • 更新时间:2022-06-24
  • 访  问  量:70
详情介绍

产品名称原代乳腺上皮细胞完全培养基Human Mammary Epithelial Cell Medium)
产品说明原代乳腺上皮细胞完全培养基Human Mammary Epithelial Cell Medium)是一种促进人乳腺原代上皮细胞体外生长的培养基。该产品是一种无菌的液体混合系统,含有维持目的细胞生长所必需的氨基酸、维生素、有机和无机化合物以及生长因子等。培养基基于碳酸氢盐的缓冲体系,在5%CO2/95%空气的培养箱中平衡时,pH值为7.4。该培养基的配方可以提供一个合适的营养环境,选择性地促进体外人乳腺原代上皮细胞的生长和扩增。


产品优势
(1) 培养成功率高

(2) 体外持续扩增

(3) 保持肿瘤原始病理特征

(4) 药敏结果与临床数据接近

使用说明:
使用前准备
1)15mL无菌离心管、移液器、移液管、无菌枪头等表面消毒后放入超净工作台中紫外照射30min。
2)提前30min从4℃冰箱取出完全培养基平衡至室温,提前从-20℃冰箱取出所需体积的细胞外基质胶冰上融化。
乳腺原代细胞培
1)采用预冷的DMEM/F12培养基将细胞外基质胶(Corning#356231)按1∶ 50比例稀释,至少提前30min 将稀释后的基质胶预铺在培养瓶/板底部表面,并使其完全覆盖底部表面,30~60 min后吸干备用。
2)将分离并计数后的细胞悬液参考表1中细胞数量接种于培养瓶/板,补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,表面消毒后放置于培养箱,37℃、5%CO2条件下进行培养。
3)原代细胞初次接种后2-3天内勿动(利于细胞贴壁)。

原代乳腺上皮细胞传代
1)镜下观察细胞形成克隆,且汇合度达80~90%时即可传代。
2)培养箱中取出细胞,弃去旧培养液,加入适量TrypLE*Express酶(Gibco#12605010)37℃孵育,10~20min后取出,轻拍培养瓶/板侧面,显微镜下观察细胞消化情况。
3)细胞消化至细胞变圆并开始脱落时用含10%胎牛血清的DMEM培养基终止消化,并将细胞转移至离心管中,室温,300g,离心5min。
4)弃上清,以1-2mL完全培养基重悬细胞,活细胞计数,将细胞悬液按适合的细胞密度接种于预铺有基质胶的培养瓶/板底部,预铺方法同上。
5) 补加完全培养基至所需体积,轻轻摇晃混匀,表面消毒后置于培养箱,37℃、5%CO2条件下继续培养。
注意事项:

  1. 本产品在使用前需平衡至室温。

  2. 使用产品时应注意无菌操作,避免污染。

  3. 本产品中不含血清,含有抗生素,如无特别需要,不用额外添加血清和其他抗生素,可直接使用。

  4. 为保持本产品的最佳使用效果,不宜将其过夜放置于室温或较高的温度环境中。

  5. 请于保质期内使用本产品,超出保质期后,将无法达到理想的使用效果。

  6. 样本若为肿瘤样本,建议使用术中样本,且肿瘤细胞比例越高(至少>50%),培养成功率越高,不推荐用于少量样本(如穿刺或者循环肿瘤细胞)的培养。

  7. 本产品仅用于科研用途,不能用于体外诊断。


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