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你知道ELISA试剂盒的原理是什么吗?让我们一起来看看吧!1971年Engvall和Perlmann发表了酶联免疫吸附剂测定(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)用于IgG定量测定的文章,使得1966年开始用于抗原定位的酶标抗体技术发展成液体标本中微量物质的测定方法。Elisa试剂盒在国内有许多种叫法,例如:Elisa检测试剂盒、ElisaKit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,Elisa生物试验...
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根据试剂的来源和标本的性状及检测的具备条件的不同,所使用的检测方法也不同,那么ELISA检测方法有哪些呢?让我们一起来看看吧!一、双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体,然后和待测血清中的响应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后加酶标记抗体,与免疫复合物中的抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原的含量。二、竞争法首先将特异性抗体包被于固相载体表面,经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,另一组只加酶标记抗原,...
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你知道不同动物细胞或组织的蛋白质抽提步骤是怎样的吗?让我们一起来看看吧!一、培养的贴壁动物细胞的蛋白质抽提步骤1.从贴壁细胞培养瓶中小心倾去培养液。2.预冷的PBS清洗贴壁的细胞2次,小心倾去PBS。3.配置含抑制剂的蛋白质抽提试剂(1ml抽提试剂中加入5μl蛋白酶抑制剂混合液,5μlPMSF和5μl磷酸酶混合液)。4.细胞瓶中加入预冷的含抑制剂的蛋白质抽提试剂(107个细胞中加入1ml抽提试剂;5×106个细胞中加入0.5ml抽提试剂),轻轻摇动5分钟。5.用一预冷的橡胶和...
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质粒构建是指选定的目的外源基因(DNA)先要经过PCR扩增。随后用限制性内切酶分别切割载体和外源DNA片段,再使用DNA连接酶将切割后的载体与DNA片段连接,转入宿主细胞。最后经过筛选鉴定出正确的重组克隆质粒,实现目的基因在宿主细胞内的正确表达。那么质粒构建实验影响因素有哪些呢?让我们一起来看看吧!一、载体的选择在选择克隆载体时应注意以下几点:①具有自主复制能力,拷贝数高;②携带易于筛选的选择标记;③含有多种限制酶的单一识别序列,以供外源基因插入;④载体应尽可能小(<15kb...
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