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2024-522
RNA的分类1.信使RNA(mRNA)信使RNA是RNA的一种,主要功能是将DNA上的遗传信息传递到蛋白质合成机器——核糖体上,从而实现蛋白质的。信使RNA的结构简单,一般由一条单链RNA组成。mRNA的长度差异较大,哺乳动物的mRNA长度一般在5×102~1×105个核苷酸,这种长度的差异使得mRNA能够携带更多的遗传信息。在细胞中,mRNA的含量占到了总RNA的1%~5%,虽然mRNA的含量相对较少,但种类繁多,因为人体中约有2万多个基因,每个基因都会产生一种mRNA。正...
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2024-517
脂质体作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分广泛,中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。下面让我们一起来看看脂质体转染的原理与方法吧!脂质体转染操作步骤进行实验之前,请先规划好实验,一般细胞转染需要24h-72h,所以要充分了解细胞生长速度,计算所需脂质体和DNA...
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2024-516
抗体是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个特征,该外来目标被称为抗原。1.做流式的抗体和免疫组化的抗体是一样的吗?不一定能通用。流式是用直接标记还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。如果你的免疫组化要用...
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2024-516
常见的RT-qPCR流程一般分为RNA提取,逆转录、荧光定量PCR三个步骤,当有的课题需要对某物种进行多种处理后,检测某个基因的表达水平,以验证该基因应对不同胁迫压力的耐受力;或者经某种病原菌侵染后,检测寄主不同基因的表达水平,以探究可能涉及的通路及互作机理等……对于这几类样本数量较大,但样本只需要检测一次的实验方案,我们常常推荐一步法RT-qPCR,即逆转录与荧光定量PCR配制一管体系,只需一次上机即可完成表达量的检测。由于将RNA逆转录与荧光定量PCR的体系配制合为一步,...
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2024-516
石蜡切片是一种常见的组织学技术,用于观察组织的微观结构。在进行石蜡切片实验时,有许多细节需要注意,这些细节往往决定了切片的质量和结果的准确性。那么石蜡切片Protocol实验需要注意哪些要点呢?本期内容将为你揭示一些关键的细节,助你获得最佳的石蜡切片效果。1.组织固定1)取新鲜组织,分割块的大小,宜小不宜大,一般不超过1cm3,用预冷的PBS冲洗,置于10%的福尔马林固定液中固定24小时。2)取出组织,蒸馏水冲洗30分钟。2.组织脱水,包埋,切片1)自动脱水:设定脱水程序,7...
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