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更新时间:2026-03-24
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线性聚乙烯亚胺PEI 25K:基因递送领域的经典之选
一、产品概述
在分子生物学与基因治疗研究领域,阳离子聚合物转染试剂因其高效、经济的特点而备受青睐。其中,polysciences 23966-1转染试剂(即PEI 25K™,线性聚乙烯亚胺,分子量25,000)作为该领域的经典产品,自问世以来已被quan-qiu数千家科研机构广泛采用。
该产品由美国Polysciences公司研发生产,该公司成立于1961年,在生命科学试剂领域拥有超过60年的技术积累。PEI 25K™凭借其的zhuo-yue转染效率和可靠的批次稳定性,成为HEK293、CHO等常用表达系统进行瞬时转染的shou-xuan工具。
二、作用机制与产品特性
聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)是一种具有高阳离子电荷密度的有机大分子,其分子结构中每相隔两个碳原子即存在一个质子化的氨基氮原子,使其在任何pH环境下都能充当有效的"质子海绵"(proton sponge)。
当用于基因递送时,PEI通过静电作用与带负电荷的DNA分子结合,形成带正电的纳米级复合物(polyplex)。这些复合物能够黏附于细胞膜表面的负电荷残基,并通过内吞作用进入细胞。进入细胞后,PEI的质子化效应引发反离子大量涌入和渗透压变化,导致内体膨胀破裂,从而将DNA释放至细胞质中,最终进入细胞核实现基因表达。
该试剂的主要技术参数如下:CAS号为9002-98-6和26913-06-4,外观呈白色至黄色固体,熔点73-75°C,可溶于热水、低pH冷水、甲醇和乙醇,但不溶于苯、yi-mi和丙酮。
三、应用优势与实验表现
在HEK293和CHO表达系统中,该试剂展现出从96孔板到100升生物反应器的规模化一致性,能够稳定实现高水平基因表达。相较于市场上其他转染方案,实验室自行配制PEI工作液可将总转染成本降低约40%,这一经济性优势使其成为工业化生产mABs、rABs、bsABs以及病毒载体(AAV、LV、BEV)的理想选择。
多项研究证实,该产品在多种细胞系中均表现出优异的转染效率。在HEK293T细胞中,采用DNA与PEI 1:2至1:4的质量比进行转染,24小时后即可观察到目标基因的表达,48-72小时达到蛋白表达峰值。对于病毒包装应用,该试剂能够支持高滴度慢病毒和腺相关病毒(AAV)的生产。
四、溶液配制与使用指南
正确的溶液配制是确保转染成功的关键步骤。以下是经Polysciences公司验证的标准配制流程:
所需材料:1g线性聚乙烯亚胺粉末、1升Milli-Q®纯水或注射用水(WFI)、12M盐酸、10M氢O化Na、0.1-0.2µm PES真空无菌过滤器、无菌聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。
配制步骤:
1. 将约450mL纯水倒入1升玻璃烧杯中,加入500mg PEI粉末,使用聚四氟乙烯搅拌棒搅拌;
2. 逐滴加入12M盐酸,将pH调节至2.0以下(约需800µL),持续搅拌2-3小时直至wan-quan溶解;
3. 逐滴加入10M氢O化Na中和至pH 7.0(约需500µL);
4. 将溶液转移至量筒,定容至500mL;
5. 使用0.22µm滤膜进行过滤除菌;
6. 分装后于-20°C保存,工作液可存放于4°C备用。
转染操作建议:
转染前一日将细胞接种至培养器皿,确保转染时细胞汇合度达到70-90%;
在无血清培养基中稀释质粒DNA,加入PEI溶液(DNA:PEI质量比建议1:2至1:4),轻柔混匀后室温孵育15分钟;
将转染复合物滴加至细胞培养液中,十字形晃动培养板使分布均匀;
转染后16-18小时更换为wan-quan培养基,继续培养至收获。
五、产品定位与选择建议
在Polysciences的PEI产品线中,PEI 25K™(货号23966系列)与升级产品PEI MAX(货号24765,分子量40,000)形成了互补的产品矩阵。PEI 25K™以其成熟的应用方案和较高的性价比,适用于常规的瞬时蛋白表达和抗体生产;而PEI MAX则凭借wan-quan水解的盐酸盐形式和更高的水溶性,在病毒包装等对细胞毒性要求更严格的场景中表现更佳。北京百奥创新科技有限公司提供polysciences 23966-1转染试剂,欢迎选购!