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更新时间:2026-03-24
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线性聚乙烯亚胺(PEI)转染技术:基因递送的高效解决方案
一、PEI转染技术概述
在分子生物学与基因治疗研究领域,阳离子聚合物转染试剂因其高效、经济的特点而备受青睐。其中,聚乙烯亚胺(Polyethylenimine,PEI)作为一种经典的高电荷密度阳离子聚合物,自1995年被Boussif等人shou-ci报道以来,已成为实验室和工业化生产中zui-chang-yong的非病毒基因递送工具之一。
polysciences PEI转染试剂(包括PEI 25K™和PEI MAX等系列)由美国Polysciences公司研发生产,该公司成立于1961年,在生命科学试剂领域拥有超过60年的技术积累。这些试剂凭借其zhuo-yue的转染效率和可靠的批次稳定性,成为HEK293、CHO等常用表达系统进行瞬时转染的shou-xuan工具。
二、作用机制与分子特性
聚乙烯亚胺是一种具有高阳离子电荷密度的有机大分子,其分子结构中每相隔两个碳原子即存在一个质子化的氨基氮原子,使其在任何pH环境下都能充当有效的"质子海绵"(proton sponge)。
当用于基因递送时,PEI通过静电作用与带负电荷的DNA分子结合,形成带正电的纳米级复合物(polyplex)。这些复合物能够黏附于细胞膜表面的负电荷残基,并通过内吞作用进入细胞。进入细胞后,PEI的质子化效应引发反离子大量涌入和渗透压变化,导致内体膨胀破裂,从而将DNA释放至细胞质中,最终进入细胞核实现基因表达。
PEI 25K™(分子量25,000)和PEI MAX(分子量40,000)是该系列的两个主要产品。PEI 25K™以其成熟的应用方案和较高的性价比,适用于常规的瞬时蛋白表达和抗体生产;而PEI MAX则凭借wan-quan水解的盐酸盐形式和更高的水溶性,在病毒包装等对细胞毒性要求更严格的场景中表现更佳。
三、应用优势与实验表现
在HEK293和CHO表达系统中,该系列试剂展现出从96孔板到100升生物反应器的规模化一致性,能够稳定实现高水平基因表达。相较于市场上其他转染方案,实验室自行配制PEI工作液可将总转染成本降低约40%,这一经济性优势使其成为工业化生产mABs、rABs、bsABs以及病毒载体(AAV、LV、BEV)的理想选择。
多项研究证实,该产品在多种细胞系中均表现出优异的转染效率。在HEK293T细胞中,采用DNA与PEI 1:2至1:4的质量比进行转染,24小时后即可观察到目标基因的表达,48-72小时达到蛋白表达峰值。对于病毒包装应用,该试剂能够支持高滴度慢病毒和腺相关病毒(AAV)的生产。
四、溶液配制与使用指南
正确的溶液配制是确保转染成功的关键步骤。以下是经Polysciences公司验证的标准配制流程:
所需材料:1g线性聚乙烯亚胺粉末、1升Milli-Q®纯水或注射用水(WFI)、12M盐酸、10M氢O化Na、0.1-0.2µm PES真空无菌过滤器、无菌聚乙烯或聚丙烯试剂瓶。
配制步骤:
1. 将约450mL纯水倒入1升玻璃烧杯中,加入500mg PEI粉末,使用聚四氟乙烯搅拌棒搅拌;
2. 逐滴加入12M盐酸,将pH调节至2.0以下(约需800µL),持续搅拌2-3小时直至wan-quan溶解;
3. 逐滴加入10M氢O化Na中和至pH 7.0(约需500µL);
4. 将溶液转移至量筒,定容至500mL;
5. 使用0.22µm滤膜进行过滤除菌;
6. 分装后于-20°C保存,工作液可存放于4°C备用。
转染操作建议:
1. 转染前一日将细胞接种至培养器皿,确保转染时细胞汇合度达到70-90%;
2. 在无血清培养基中稀释质粒DNA,加入PEI溶液(DNA:PEI质量比建议1:2至1:4),轻柔混匀后室温孵育15分钟;
3. 将转染复合物滴加至细胞培养液中,十字形晃动培养板使分布均匀;
4. 转染后16-18小时更换为wan-quan培养基,继续培养至收获。
五、产品选择与购买信息
polysciences PEI转染试剂提供多种包装规格以满足不同实验规模需求。以PEI 25K™(货号23966系列)为例,提供100mg、1g等多种规格,用户可根据实验需求选择粉末或预配制溶液形式。北京百奥创新科技确保zheng-pin保障和技术支持,欢迎选购。
对于追求经典实验方案重现性的研究者,PEI 25K™依然是值得信赖的选择。其稳定的化学性质和经过时间验证的转染效率,使其成为实验室基因递送工具箱中的常备试剂。而对于需要更高转染效率和更低细胞毒性的应用场景,PEI MAX(货号24765系列)则提供了更优的解决方案。
polysciences转染试剂代理——北京百奥创新科技有限公司:
一、辐射五大服务方向:
1.国内试剂耗材经销代理;
2.国外试剂订购(直订,或境外代理);
3.基因组测序(二代,二代+三代);
4.基因分型(SNP检测):低/中/中 高通量项目;
5.生物样本运输(国内、);
二、多家代理品牌,涉及30多种较有名品牌,经营代理500多个品牌:
Qiagen、Sigma、R&D、Epigentek、ThermoFisher、DNA Genotek、USA Scientific、Matreya、Sage Science、List Labs、Macrocyclics、Steraloids、NIBSC、mobio、immunodx、cellsystems、medicago、abcam、CST、Roche、Bethyl、sino Biological、clodrosome、adi BIO-WORLD、TOKU-E、HYPHEN BioMed、moltox、ZeptoMetrix、International Humic、biocytex、Toxin Technology 、Streck、Elastin、biomax、Orflo Technologies、Accegen、Advbiomart、genlantis、R&D、Cygnus Technologies LLC、Enzyme Research、Bio/Data Corporation、Greer Lab 、Solarbio、bangslabs、bioline、musechem、Novocastra stemrd、hyphen-biomed、polyplus、moltox 、exiqon、pentapharm、verichemlabs、GenStar、ALZET、lucernatechnologies 、meridian、origene、zimmerpeacocktech、horizondiscovery、Reagents、megazyme、elisasystems………
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